6种渔药制剂对马口鱼幼鱼的急性毒性及安全评价

林而舒; 陈斌; 樊海平; 钟全福; 吴斌; 朱坤远

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2023.07.012

6种渔药制剂对马口鱼幼鱼的急性毒性及安全评价

1.
福建省淡水水产研究所，福建　福州　350000
2.
龙岩学院，福建　龙岩　364012

基金项目: 福建省种业创新与产业化工程项目（2021MNZ05）

详细信息

作者简介:
林而舒（1993 —），女，硕士，助理农艺师，主要从事水产养殖及病害防治研究，E-mail：linershu@qq.com

通讯作者:
樊海平（1967 —），男，硕士，研究员，主要从事水产养殖病害研究，E-mail：fanhaiping16@163.com

中图分类号: S948
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出版历程
- 收稿日期: 2022-02-27
- 修回日期: 2022-04-17
- 网络出版日期: 2023-07-15
- 刊出日期: 2023-07-27

Acute Toxicities of Six Aquaculture Drugs on Juvenile Opsariichthys bidens

1.
Freshwater Fisheries Research Institute of Fujian Province, Fuzhou, Fujian,　350002, China
2.
Longyan University, Longyan, Fujian　364012, China

摘要

摘要:
目的探明常用渔药制剂对马口鱼幼鱼的毒性和安全使用剂量，保障其养殖过程中渔药的安全使用。
方法在水温25.8～28.3 ℃的室外条件下，采用静水式试验法测定6种常用渔药制剂对马口鱼幼鱼的急性毒性，并通过药物毒性积蓄系数（Medicine toxicity accumulation coefficient，MAC）分析制剂对马口鱼幼鱼的急性致毒效应特征。
结果 6种渔药制剂对马口鱼幼鱼的安全质量浓度从高到低依次为美婷Ⅱ（2.222 mg·L⁻¹）、车轮虫必克（0.790 mg·L⁻¹）、聚维酮碘（0.659 mg·L⁻¹）、拜特新敌磷（0.225 mg·L⁻¹）、拜特指环敌（0.214 mg·L⁻¹）、白点净（0.006 mg·L⁻¹）；对马口鱼幼鱼的MAC值均为正值，但其变化趋势不同，表明6种药物积蓄作用强于降减作用，且受试生物对药物敏感程度存在差异。
结论依据有毒物质对鱼类毒性等级的评价标准，对马口鱼幼鱼，美婷Ⅱ为低毒渔药制剂，车轮虫必克、聚维酮碘、拜特新敌磷和拜特指环敌为中毒渔药制剂，白点净为剧毒渔药制剂。
- 渔药制剂 /
- 马口鱼 /
- 急性毒性 /
- 安全浓度 /
- 药物毒性积蓄系数 /
- 安全评价
Abstract:
Objective Acute toxicities of 6 aquaculture drugs on juvenile Opsariichthys bidens were determined for safe applications.
Method Medicine toxicity accumulation coefficients (MACs) of 6 drugs commonly applied for aquaculture were determined on the fish in a tank at a controlled temperature of 25.8–28.3 ℃.
Result The drugs at specific doses displayed varied degrees of safety that ranked as Meiting Ⅱ (2.222 mg·L⁻¹)＞Chelunchongbike (0.790 mg·L⁻¹)＞povidone iodine (0.659 mg·L⁻¹)＞Baitexindilin (0.225 mg·L⁻¹)＞Baitezhihuandi (0.214 mg·L⁻¹)＞Baidianjing (0.006 mg·L⁻¹). The MACs of these drugs on O. bidens were positive but differed in the toxic effect to the fish due to differentiated accumulation and degradation of as well as sensitivity of the fish to the individual drugs.
Conclusion According to the classification standards, Meiting Ⅱ was determined to be low toxic, while Chelunchongbike, povidone iodine, Baitexindilin, and Baitezhihuandi, moderately toxic, and Baidianjing, highly toxic to O. bidens juveniles.
- Aquaculture drugs /
- Opsariichthys bidens /
- acute toxicity /
- safety mass concentration /
- drug toxicity accumulation coefficient /
- safety concentration

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0. 引言

【研究意义】水稻纹枯病是由Rhizoctonia solani Kühn引起的真菌性病害，是世界上水稻最严重的病害之一，威胁着水稻的产量和质量^[1]，一般造成10%～30%产量损失，严重时达到50%以上^[2]。近年来，由于栽培措施、感病品种大面积种植以及环境条件的影响，水稻纹枯病的危害逐年加重，已经成为我国南方部分稻区的水稻三大病害之首^[3]。目前，使用杀菌剂进行化学防治仍是水稻纹枯病最有效的防控方法^[4]。但随着药剂的长年使用和剂量的提高，会降低病原菌对防治药剂的敏感性，产生抗药性^[5]，因此，监测水稻纹枯病菌对防治药剂的敏感性具有重要意义。【前人研究进展】井冈霉素是我国产量最大的微生物源抗生素，广泛用于防治水稻纹枯病，但由于单一长期的使用，在一些地区已有产生井冈霉素抗药性菌株的报道^[3-6]。为此，我国登记了一些药剂替代井冈霉素用于防治水稻纹枯病，如苯醚甲环唑、咪鲜胺、已唑醇、噻呋酰胺等^[3-7]，其他一些未进行登记的药剂也在用于防治水稻纹枯病，如丙环唑和吡唑醚菌酯及其复配剂^[8-9]。丙环唑属于三唑类杀菌剂，具有内吸性、广谱、高效等特点，对丝核菌属的病原真菌具有很高的生物活性^[10]。唐正合等研究表明，丙环唑对水稻纹枯病菌菌丝的抑制作用较好，在田间的防治效果可达到89.15%^[11]。吡唑醚菌酯属于甲氧基丙烯酸酯类，具有广谱、高效、毒性低等特点，对非靶标生物安全^[12]。孙雪等研究不同药剂对纹枯病菌的毒力作用表明，吡唑醚菌酯对纹枯病菌菌丝的抑制作用较好，其EC₅₀值为0.198 mg·L⁻¹^[13]，刘郁等研究表明吡唑醚菌酯对水稻纹枯病也有较好的防治效果^[14]。随着药剂使用年限延长和剂量的提高，病原菌的敏感性可能会降低以及产生抗性菌株。因此需要检测病原菌对药剂的敏感性情况，连娜娜等^[7]测定东北三省水稻纹枯病病菌对苯醚甲环唑和咪鲜胺的敏感性，谭清群等^[3]测定贵州水稻纹枯病菌对噻呋酰胺和己唑醇的敏感性，为水稻纹枯病的科学选药提供了依据。【本研究切入点】目前，丙环唑和吡唑醚菌酯用于水稻纹枯病及其他水稻病害的防治，但水稻纹枯病菌对这两种药剂的敏感性及药剂间的相关性尚不清楚，也未见相关文献报道。【拟解决的关键问题】以贵州省不同地区分离的水稻纹枯病菌菌株为研究对象，测定所得菌株对这两种药剂的敏感性，并分析两种药剂间的相关性，以期为贵州省水稻纹枯病的科学防治和药剂的合理使用提供参考。

1. 材料与方法

1.1 供试菌株

水稻纹枯病菌：于2018年从贵州省遵义市湄潭县、黔东南州黄平县、黔东南州三穗县及黔南州惠水县等水稻产区采集水稻纹枯病发生严重的植株样本，经分离纯化得到52株水稻纹枯病菌。其中，湄潭（MT）18株、黄平（HP）12株、三穗（SS）9株、惠水（HS）13株。试验于2018年9～12月在贵州大学农产品质量安全实验室进行。

1.2 供试药剂及培养基

96%丙环唑原药（连云港埃森化学有限公司），97.5%吡唑醚菌酯原药（江苏新农化工有限公司），用丙酮配制10 000 μg·mL⁻¹母液，置于4℃冰箱备用。

PDA培养基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂 17～20 g，去离子水1 000 mL，121℃灭菌20 min备用。

琼脂培养基：琼脂15 g，去离子水1 000 mL，121℃灭菌20 min备用。

1.3 水稻纹枯病菌分离

采用水琼脂法^[15]。将采集的发病植株样本沿病斑剪成小块，75%的酒精消毒30 s后用无菌水冲洗，再用灭菌的滤纸吸干表面水珠，置于水琼脂平板上，于28℃培养箱中黑暗培养3 d，将病斑周围长出的菌落转接于PDA平板上，单菌丝纯化3代后转接至PDA试管斜面上，置于4℃冰箱保存。

1.4 水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性测定

采用菌丝生长速率法^[16]。将丙环唑和吡唑醚菌酯母液用无菌水稀释为系列梯度浓度，取1 mL稀释药剂加入到9 mL预先融化的PDA培养基中，倒入灭菌培养皿混匀，配制含丙环唑（0.073、0.220、0.660、2.000、6.000 μg·mL⁻¹）和吡唑醚菌酯（0.125、0.250、0.500、1.000、2.000 μg·mL⁻¹）系列质量浓度的PDA平板，其中吡唑醚菌酯含药平板中加入50 mg·L⁻¹水杨羟肟酸^[12]。将培养的菌株用6 mm打孔器沿菌落边缘打取菌饼，接种至含药PDA平板上，以不加药为对照，每个处理重复3次，置于28℃培养2 d后，用十字交叉法测量菌落直径。

1.5 数据处理

根据公式（1）计算菌丝生长抑制率，利用Excel 2010计算药剂对菌株的有效抑制中浓度（EC₅₀值）、相关系数（R值）及毒力回归方程。使用SPSS 24就水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性进行相关性分析。

$\!\!\!\!\!\!\!\!\! \begin{aligned} & \text{菌丝生长抑制率}\left( \% \right) =\\ & \frac{{\text{对照菌落生长直径} - \text{处理菌落生长直径}}}{{\text{对照菌落生长直径} - 6}} \times 100 \end{aligned}$

1.6 水稻纹枯病菌对两种药剂敏感性的相关性

参照徐建强等^[17]的方法。从各地随机选取9株水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性进行相关性分析。将菌株对丙环唑的EC₅₀值作为x轴，对吡唑醚菌酯的EC₅₀值作为y轴，进行线性回归分析，求出线性回归方程（y=bx+a）。根据决定系数（R²）、b值及F检验的显著水平（P值），分析两种药剂对水稻纹枯病菌敏感性之间的关系，其中P＜0.05，b值为正，说明两种药剂间存在正相关性，b值为负，说明两种药剂间存在负相关性；P＞0.05，说明两种药剂间无相关性^[7]。

2. 结果与分析

2.1 贵州省水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性及频率分布

贵州省52株水稻纹枯病菌对丙环唑的敏感性呈连续性分布，EC₅₀值为0.058～2.381 μg·mL⁻¹，平均值为0.422 μg·mL⁻¹，敏感性相差41倍，表明水稻纹枯病菌对丙环唑的敏感性不同。将水稻纹枯病菌对丙环唑的EC₅₀值进行分组，以0.05 μg·mL⁻¹为下限，组距为0.48 μg·mL⁻¹，共分为5组。统计各组的菌株数，计算其出现频率，制作水稻纹枯病菌菌株对丙环唑的敏感性频率分布图（图1）。由敏感性频率分布图可知，EC₅₀值在0.05～0.53 μg·mL⁻¹的菌株数较多，频率为67.3%。通过SPSS进行Shapiro-Wilktest正态性检验分析，结果显示水稻纹枯病菌对丙环唑的敏感性不符合正态分布（W=0.702，P=0.00＜0.05），表明纹枯病菌对丙环唑的敏感性出现分化，出现了敏感性下降的菌株^[14]。

图 1 水稻纹枯病菌对丙环唑（A）和吡唑醚菌酯（B）的敏感性

Figure 1. Sensitivities of R. solani to propiconazole (A) and pyraclostrobin (B)

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贵州省52株水稻纹枯病菌对吡唑醚菌酯的敏感性呈连续性分布，EC₅₀值为0.077～0.936 μg·mL⁻¹，平均值为0.313 μg·mL⁻¹，敏感性弱的菌株EC₅₀值是敏感性较强的12.1倍，表明水稻纹枯病菌对吡唑醚菌酯的敏感性存在差异。将水稻纹枯病菌对吡唑醚菌酯的EC₅₀值进行分组，以0.060 μg·mL⁻¹为下限，组距为0.188 μg·mL⁻¹，共分为5组。统计各组的菌株数，计算其出现频率，制作水稻纹枯病菌菌株对吡唑醚菌酯的敏感性频率分布图（图2）。由敏感性频率分布图可知，EC₅₀值在0.060～0.248 μg·mL⁻¹的菌株数较多，频率为51.9%。通过SPSS进行Shapiro-Wilktest正态性检验分析，结果显示水稻纹枯病菌对吡唑醚菌酯的敏感性不符合正态分布（W=0.777，P=0.00＜0.05），表明纹枯病菌对吡唑醚菌酯的敏感性出现分化，出现了敏感性下降的菌株^[7]。

图 2 水稻纹枯病菌对丙环唑（A）和吡唑醚菌酯（B）的敏感性频率分布

Figure 2. Frequency distributions of sensitivities of R. solani to propiconazole (A) and pyraclostrobin (B)

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2.2 不同地区纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性分析

贵州省不同地区的纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性不同（表1）。其中，湄潭、三穗地区菌株对丙环唑的EC₅₀均值分别为0.623、0.635 μg·mL⁻¹，两地之间的差异不显著，而与惠水（0.256 μg·mL⁻¹）、黄平（0.140 μg·mL⁻¹）两地的均值存在显著差异；湄潭地区菌株对吡唑醚菌酯的EC₅₀均值为0.525 μg·mL⁻¹，与惠水、黄平、三穗三个地区的均值存在显著差异，而惠水、黄平、三穗菌株对吡唑醚菌酯的EC₅₀均值无显著差异。

表 1 不同地区纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性

Table 1. Pesticide sensitivities of R. solani from different regions

采集地 Locality	菌株数 Isolate number	丙环唑 propiconazole		吡唑醚菌酯 pyraclostrobin
采集地 Locality	菌株数 Isolate number	EC₅₀范围 Range of EC₅₀/（μg·mL⁻¹）	EC₅₀均值 Average value of EC₅₀/（μg·mL⁻¹）	EC₅₀范围 Range of EC₅₀/（μg·mL⁻¹）	EC₅₀均值 Average value of EC₅₀/（μg·mL⁻¹）
惠水 HS Huishui	13	0.065～0.519	（0.256±0.048）b	0.077～0.234	（0.153±0.016）b
湄潭 MT Meitang	18	0.077～2.381	（0.623±0.169）a	0.156～0.936	（0.525±0.062）a
黄平 HP Huangping	12	0.066～0.209	（0.140±0.013）b	0.126～0.383	（0.241±0.020）b
三穗 SS Sansui	9	0.498～1.060	（0.635±0.056）a	0.127～0.317	（0.217±0.019）b
注：同列数字后不同字母表示经新复极差法检验差异显著（P＜0.05）。 Note: Data followed by the different letters are significantly by new multiple range test（ P ＜0.05）.

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2.3 不同地区水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的抗性水平分析

参考梁梦琦^[12]的方法，以EC₅₀均值进行抗性水平划分。从抗性频率分布表可知（表2），多数水稻纹枯病菌菌株对两种药剂都处于敏感水平，湄潭地区出现了对丙环唑和吡唑醚菌酯低抗水平的菌株，抗性频率分别为16.7%、13.3%。惠水、湄潭、黄平、三穗菌株对丙环唑的抗性水平范围分别为0.14～1.23、0.18～5.64、0.16～0.50、1.18～2.51，对吡唑醚菌酯的抗性水平范围分别为0.24～0.75、0.50～3.01、0.40～1.22、0.41～1.01，其中黄平菌株对丙环唑的抗性水平最低，惠水菌株对吡唑醚菌酯的抗性水平最低。

表 2 不同地区水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的抗性水平

Table 2. Pesticide resistances of R. solani from different regions

采集地 Locality	菌株数 Isolate number	丙环唑				吡唑醚菌酯
		不同抗性水平菌株频率 Frequencies at different resistance level/%		抗性频率 Resistance frequencies/%	抗性水平范围 Range of resistance level	不同抗性水平菌株频率 Frequencies at different resistance level/%		抗性频率 Resistance frequencies/%	抗性水平范围 Range of resistance level
		Rf＜3	3＜Rf≤10	抗性频率 Resistance frequencies/%	抗性水平范围 Range of resistance level	Rf＜3	3＜Rf≤10	抗性频率 Resistance frequencies/%	抗性水平范围 Range of resistance level
惠水 HS Huishui	13	100	0	0	0.14～1.23	100	0	0	0.24～0.75
湄潭 MT Meitang	18	83.3	16.7	16.7	0.18～5.64	86.6	13.3	13.3	0.50～3.01
黄平 HP Huangping	12	100	0	0	0.16～0.50	100	0	0	0.40～1.22
三穗 SS Sansui	9	100	0	0	1.18～2.51	100	0	0	0.41～1.01

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2.4 不同来源菌株对丙环唑和吡唑醚菌酯的系统聚类分析

利用SPSS 24软件将52株水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的EC₅₀值进行系统聚类分析，结果如图3所示。52株纹枯病菌对丙环唑的EC₅₀共分为4个聚类组，第一组共有29株，其中湄潭9株（MT13，MT14，MT8，MT18，MT5，MT17，MT9，MT16，MT6），黄平12株（HP4，HP2-8，HP2-5，HP2-7，HP6，HP7，HP8，HP2-4，HP9，HP2-6，HP2，HP12），惠水8株（HS10，HS2，HS14，HS4，HS7，HS9，HS11，HS3）；第二组共有2株，其中湄潭1株（MT1），三穗1株（SS1）；第三组共有18株，其中湄潭5株（MT10，MT11，MT15，MT12，MT7），惠水5株（HS2-9，HS2-1，HS2-10，HS2-3，HS2-11），三穗8株（SS4，SS7，SS9，SS8，SS2，SS3，SS5，SS6）；第四组共有3株，均为湄潭菌株（MT2，MT3，MT4）。52株纹枯病菌对吡唑醚菌酯的EC₅₀值也分为4个聚类组，第一组共有12株，其中惠水7株（HS14，HS2-1，HS2，HS7，HS9，HS2-3，HS2-9），湄潭1株（MT8），黄平2株（HP2，HP6），三穗2株（SS8，SS2）；第二组共有28株，其中惠水6株（HS11，HS10，HS2-10，HS2-11，HS4，HS3），三穗7株（SS4，SS6，SS5，SS1，SS3，SS9，SS7），黄平9株（HP4，HP7，HP2-8，HP12，HP2-5，HP2-4，HP2-7，HP8，HP9），湄潭6株（MT11，MT14，MT9，MT2，MT16，MT12）；第三组共有5株，其中湄潭4株（MT3，MT1，MT17，MT6），黄平1株（HP2-6），第四组共有7株，均为湄潭菌株（MT15，MT4，MT18，MT13，MT7，MT5，MT10）。不同地理来源的菌株均能出现在同一聚类组中，只有湄潭地区的几个菌株单独在一组，表明水稻纹枯病菌对这两种药剂的敏感性差异与菌株地理来源在地区之间无明显相关性^[18]。

图 3 水稻纹枯病菌对丙环唑（A）和吡唑醚菌酯（B）的EC₅₀值系统聚类分析

注：A代表丙环唑聚类分析，B代表吡唑醚菌酯聚类分析

Figure 3. Cluster analysis on EC₅₀ of R. solani to propiconazole （A） and pyraclostrobin （B）

Note: A=cluster analysis for propiconazole, B=cluster analysis for pyraclostrobin

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2.5 水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的相关性

水稻纹枯病菌菌株对丙环唑和吡唑醚菌酯敏感性的决定系数（R²）为0.001 2，线性回归方程为y = 1.498 1x + 0.081 2，进行F检验为差异不显著（P=0.84＞0.05），说明水稻纹枯病菌对这两种药剂的敏感性不存在相关性（图4），即丙环唑与吡唑醚菌酯之间未产生交互抗性，生产上可交替使用。

图 4 水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯敏感性的相关性

Figure 4. Correlation on pesticide sensitivities of R. solani between propiconazole and pyraclostrobin

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3. 讨论与结论

本研究采用菌丝生长速率法，测定了从贵州省黄平、三穗、湄潭、惠水等四个地区分离的52个菌株对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性。供试菌株对丙环唑的EC₅₀值为0.058～2.381 μg·mL⁻¹，均值为0.422 μg·mL⁻¹。孙树青等^[19]测定水稻纹枯病菌对丙环唑的EC₅₀值为0.045 μg·mL⁻¹，与本研究的EC₅₀均值相差较大，可能是不同地区间的施药方式、用药量、用药次数以及使用年限不同所导致。不同菌株之间敏感性差异较大，EC₅₀值最大与最小相差41倍，表明出现了敏感性下降的群体，水稻纹枯病菌对丙环唑存在抗药性风险，应加强纹枯病菌对丙环唑的抗性监测。供试菌株对吡唑醚菌酯的EC₅₀值为0.077～0.936 μg·mL⁻¹，均值为0.313 μg·mL⁻¹，与孙雪^[20]的测定结果相近（0.198 μg·mL⁻¹），表明纹枯病菌对吡唑醚菌酯的敏感性仍较敏感，可以继续用其防治水稻纹枯病。

水稻纹枯病病原菌存在菌丝融合群和异核现象，可能会导致病原菌的致病力和敏感性存在差异。范文艳等^[21]报道黑龙江省水稻纹枯病病菌存在明显的致病性分化。陈涛等^[22]报道浙江省水稻纹枯病菌分属于AG-1融合群（AG-1-I A、AG-1-I B、AG-1-I C），且AG-1融合群菌株间致病力差异无相关性。刘志恒等^[23]报道辽宁省水稻纹枯病病菌分属于4个菌丝融合群（AG1-IA，AG4-HGI，AG4-HGII融合群和双核菌菌丝融合群）。张优等^[24]研究表明水稻纹枯病病菌多核菌株均表现为较强致病性而双核菌株均表现出较弱致病性。水稻纹枯病病菌不同菌株间对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性差异与菌丝融合群和异核是否有关，还需要进一步验证。

不同地区间的水稻纹枯病菌群体对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性不同，对于丙环唑而言，湄潭、三穗两个地区的纹枯病菌群体与黄平、惠水两个地区的敏感性差异显著；而吡唑醚菌酯对湄潭地区纹枯病菌群体与惠水、黄平、三穗3个地区的敏感性差异显著，这可能与当地这两种药的使用年限和使用量不同有关。4个地区中仅有湄潭地区出现对丙环唑和吡唑醚菌酯的低抗菌株，抗性频率分别为16.7%、13.3%。总体而言，贵州省水稻纹枯病菌对这两种药剂仍敏感，且两药剂之间也未产生交互抗性，表明这两种药剂仍可继续用于防治水稻纹枯病。为了避免抗药性的产生，应与其他药剂轮换使用，同时需要适当减少用药量和用药次数。

研究结果表明，在所有供试菌株中，多数菌株对丙环唑和吡唑醚菌酯敏感性较高，不同地区之间菌株群体的敏感性不同。水稻纹枯病菌对这两种药剂的敏感性差异与菌株地理来源无明显相关性。丙环唑与吡唑醚菌酯之间未产生交互抗性，生产上可以交替使用防治水稻纹枯病。

表 1 试验用渔药种类

Table 1 Aquaculture drugs tested

渔药制剂名称 Drug names	主要成分及有效含量 Main components and content	生产厂家 Manufacture factory
美婷Ⅱ Meiting Ⅱ	皮乐宝（溴硝基丙二醇）、硫酸亚铁 2-Bromo-2-nitro-1,3-propanediol、FeSO₄	长沙拜特生物科技研究所有限公司 Changsha Beite Biotechnology Research Institute Co., Ltd.
聚维酮碘 Povidone iodine	聚维酮碘 Povidone iodine（10%）	厦门惠盈动物渔业有限公司 Xiamen Huiying Animal and Fishery Co., Ltd.
拜特指环敌 Baitezhihuandi	甲苯咪唑 Mebendazole（10%）	长沙拜特生物科技研究所有限公司 Changsha Beite Biotechnology Research Institute Co., Ltd.
拜特新敌磷 Baitexindilin	O,O-二甲基-（2,2,2-三氯-1-羟基乙基）磷酸酯 O,O-dimethyl-(2,2,2-trichloro-1-hydroxyethyl)phosponate （90%）	长沙拜特生物科技研究所有限公司 Changsha Beite Biotechnology Research Institute Co., Ltd.
车轮虫必克 Chelunchongbike	槟榔碱、苦参碱 Arecoline、Matrine	山西争跃化工药业有限公司 Shanxi Zhengyue Chemical Pharmaceutical Co., Ltd.
白点净 Baidianjing	有机铜化合物 Organic copper（10%）	山西争跃化工药业有限公司 Shanxi Zhengyue Chemical Pharmaceutical Co., Ltd.

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表 2 各试验渔药制剂质量浓度

Table 2 Mass concentrations of 6 aquaculture drugs

渔药制剂名称 Drug names	药物质量浓度 Mass concentration/(mg·L⁻¹)
美婷Ⅱ Meiting Ⅱ	9.880	14.810	22.220	33.330	50.000	75.000
聚维酮碘 Povidone iodine	6.016	6.296	6.597	6.904	7.233	7.574	7.931
拜特指环敌 Baitezhihuandi	2.000	2.090	2.190	2.300	2.410	2.520	2.640	2.760
拜特新敌磷 Baitexindilin	1.490	1.710	1.966	2.260	2.590	2.960	3.390	3.885
车轮虫必克 Chelunchongbike	6.285	7.054	7.920	8.880	9.970	11.200
白点净 Baidianjing	0.046	0.056	0.068	0.083	0.101	0.123	0.150
除美婷Ⅱ和车轮虫必克外，其他药物浓度以有效成分含量计算。由于美婷Ⅱ和车轮虫必克使用说明书上未标注主要成分的有效含量，故药物浓度以制剂浓度为标准进行计算。 Drug concentrations were calculated based on content of active component. On MeitingⅡ and Chelunchongbike, of which no active ingredients contents were given in user manuals, concentrations of total dry weight are shown.

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表 3 不同渔药制剂对马口鱼幼鱼死亡率的影响

Table 3 Mortality of juvenile O. bidens caused by drug applications

渔药制剂名称 Drug names	药物质量浓度 Mass concentration/ (mg·L⁻¹)	死亡率 Mortality rate/%
渔药制剂名称 Drug names	药物质量浓度 Mass concentration/ (mg·L⁻¹)	24 h	48 h	72 h	96 h
美婷Ⅱ Meiting Ⅱ	0	0	0	0	0
	9.880	0	0	0	0
	14.810	0	20.0	20.0	20.0
	22.220	0	20.0	20.0	20.0
	33.330	20.0	80.0	100.0
	50	80.0	100.0
	75.000	100.0
聚维酮碘 Povidone iodine	0	0	0	0	0
	6.016	0	0	0	0
	6.296	0	20.0	20.0	20.0
	6.597	20.0	20.0	40.0	80.0
	6.904	60.0	60.0	66.7	80.0
	7.233	63.3	63.3	73.3	80.0
	7.574	96.7	96.7	100.0
	7.931	100.0
拜特指环敌 Baitezhihuandi	0	0	0	0	0
	2.000	0	0	0	0
	2.090	0	0	40.0	40.0
	2.190	20.0	20.0	40.0	60.0
	2.300	20.0	40.0	60.0	100.0
	2.410	40.0	40.0	80.0	100.0
	2.520	60.0	60.0	100.0
	2.640	60.0	100.0
	2.760	100.0
拜特新敌磷 Baitexindilin	0	0	0	0	0
	1.490	0	0	0	0
	1.710	10.0	10.0	10.0	10.0
	1.966	26.7	26.7	26.7	26.7
	2.260	40.0	40.0	40.0	40.0
	2.590	60.0	80.0	80.0	80.0
	2.960	80.0	90.0	90.0	90.0
	3.390	96.7	100.0
	3.885	100.0
车轮虫必克 Chelunchongbike	0	0	0	0	0
	6.285	0	0	0	0
	7.054	0	3.3	3.3	20.0
	7.920	23.3	23.3	23.3	23.3
	8.880	40.0	100.0
	9.970	80.0	100.0
	11.200	100.0
白点净 Baidianjing	0	0	0	0	0
	0.046	0	0	0	0
	0.056	0	30.0	40.0	40.0
	0.068	0	70.0	90.0	90.0
	0.083	0	90.0	100.0
	0.101	6.7	80.0	100.0
	0.123	80.0	100.0
	0.150	100.0

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表 4 渔药对马口鱼幼鱼的回归方程、半致死浓度和安全质量浓度

Table 4 Regression equations, LC₅₀, and safety concentrations of 6 aquaculture drugs on juvenile O. bidens

渔药制剂名称 Drug names	时间 Time/h	回归方程 Regression equation	半致死浓度 LC₅₀/(mg·L^-1)	95%置信区间 95% confidence interval/(mg·L^-1)	药物毒性蓄积程度系数 MAC/%	安全质量浓度 SC/(mg·L^-1)
美婷Ⅱ Meiting Ⅱ	24	y =204.42x–279.30(R²=0.9530)	40.822	35.412～47.059		2.222
	48	y =147.67x–154.88(R²=0.8990)	24.401	20.502～29.043	88.265
	72	y =170.43x–179.52(R²=0.7628)	22.218	19.274～25.613	11.734
	96	y =170.43x–179.52(R²=0.7628)	22.218	19.274～25.613	0
聚维酮碘 Povidone iodine	24	y =1196.40x–956.02(R²=0.9463)	6.932	6.629～7.250		0.659
	48	y =1196.40x–956.20(R²=0.9463)	6.932	6.629～7.250	0
	72	y =1096.80x–864.45(R²=0.8168)	6.819	6.508～7.145	33.041
	96	y =970.78x–745.02(R²=0.8260)	6.590	6.295～6.901	66.959
拜特指环敌 Baitezhihuandi	24	y =742.19x–240.05(R²=0.9292)	2.459	2.388～2.533		0.214
	48	y =871.50x–280.19(R²=0.9232)	2.393	2.328～2.459	20.820
	72	y =710.62x–198.75(R²=0.9130)	2.225	2.166～2.286	52.997
	96	y =1580.00x–472.72(R²=0.9838)	2.142	2.100～2.185	26.183
拜特新敌磷 Baitexindilin	24	y =282.36x–54.03(R²=0.9881)	2.336	2.038～2.677		0.225
	48	y =304.45x–57.04(R²=0.9664)	2.247	1.996～2.529	100
	72	y =304.45x–57.04(R²=0.9664)	2.247	1.996～2.529	0
	96	y =304.45x–57.04(R²=0.9664)	2.247	1.996～2.529	0
车轮虫必克 Chelunchongbike	24	y =506.92x–432.38(R²=0.9793)	8.945	8.482～9.433		0.790
	48	y =939.30x –802.36(R²=0.8724)	8.081	7.830～8.341	82.521
	72	y =939.30x–802.36(R²=0.8724)	8.081	7.830～8.341	0
	96	y =589.99x–479.52(R²=0.7589)	7.898	7.584～8.225	17.479
白点净 Baidianjing	24	y =580.60x+588.37(R²=0.8952)	0.118	0.112～0.125		0.006
	48	y =222.59x +312.10(R²=0.8571)	0.066	0.060～0.074	88.136
	72	y =406.76x +550.10(R²=0.9457)	0.059	0.055～0.063	11.865
	96	y =406.76x +550.10(R²=0.9457)	0.059	0.055～0.063	0

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施引文献(10)

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0. 引言
1. 材料与方法
1.1 供试菌株
1.2 供试药剂及培养基
1.3 水稻纹枯病菌分离
1.4 水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性测定
1.5 数据处理
1.6 水稻纹枯病菌对两种药剂敏感性的相关性
2. 结果与分析
2.1 贵州省水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性及频率分布
2.2 不同地区纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性分析
2.3 不同地区水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的抗性水平分析
2.4 不同来源菌株对丙环唑和吡唑醚菌酯的系统聚类分析
2.5 水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的相关性
3. 讨论与结论

0. 引言
1. 材料与方法
1.1 供试菌株
1.2 供试药剂及培养基
1.3 水稻纹枯病菌分离
1.4 水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性测定
1.5 数据处理
1.6 水稻纹枯病菌对两种药剂敏感性的相关性
2. 结果与分析
2.1 贵州省水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性及频率分布
2.2 不同地区纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性分析
2.3 不同地区水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的抗性水平分析
2.4 不同来源菌株对丙环唑和吡唑醚菌酯的系统聚类分析
2.5 水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的相关性
3. 讨论与结论

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施引文献

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6种渔药制剂对马口鱼幼鱼的急性毒性及安全评价

作者简介: 林而舒（1993 —），女，硕士，助理农艺师，主要从事水产养殖及病害防治研究，E-mail：linershu@qq.com

通讯作者: 樊海平（1967 —），男，硕士，研究员，主要从事水产养殖病害研究，E-mail：fanhaiping16@163.com

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