2019年 34卷 第5期
2019, 34(5): 509-515.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.002
摘要:
目的 筛选出低吸收累积重金属Cd、Pb的水稻种质资源，为Cd、Pb污染地区水稻种植品种的选择和抗性品种的选育提供理论依据。 方法 选用60个水稻品种，用塑料盆置于网室水泥槽中种植水稻，共分3个组，第1组为不加重金属的对照组；第2组为添加重金属Cd的Cd处理组，以CdCl2·2.5H2O形态加入土壤中，使Cd含量达到土壤环境质量标准三级中镉的临界值（1 mg·kg-1）；第3组为添加重金属Pb的Pb处理组，以Pb（CH3COO）2·3H2O形态加入土壤中，使Pb含量达到土壤环境质量标准三级中铅的临界值（500 mg·kg-1）。成熟期收获种子晒干，保存3个月后，采用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定3组材料糙米中Cd和Pb含量。 结果 （1）不同水稻品种对Cd的吸收力差异显著，Cd处理组糙米Cd含量变幅在0.133~3.308 mg·kg-1，对照组糙米Cd含量变幅在0.005~0.224 mg·kg-1，Cd处理组糙米Cd平均含量是对照组的19.63倍，差异达极显著水平（P < 0.01），且不同品种Cd处理组糙米Cd含量与对照组糙米Cd含量呈极显著正相关；Cd处理组有1个品种（台粳8号）糙米Cd含量在可食用标准0.2 mg·kg-1以内，说明台粳8号是低吸收Cd的品种。（2）不同水稻品种对Pb的吸收力差异显著，Pb处理组糙米Pb含量变幅在0.183~2.123 mg·kg-1，对照组糙米Pb含量变幅在0.010~0.288 mg·kg-1，Pb处理组糙米Pb平均含量是对照组的10.66倍，差异达极显著水平（P < 0.01），但不同水稻品种Pb处理组糙米Pb含量与对照组糙米Pb含量相关不显著；Pb处理组有2个品种（金早6号、宁粳216）糙米Pb含量在可食用标准0.2 mg·kg-1以内，说明金早6号、宁粳216是低吸收Pb的品种。（3）籼稻糙米Cd含量显著高于粳稻，但Pb含量籼稻与粳稻无显著差异。（4）不同种皮色水稻品种对Cd、Pb吸收力有差异，表现为红米>黑米>白米。 结论 土壤环境三级质量标准的稻田已基本不适宜种植水稻，但水稻对Cd、Pb的吸收力存在明显的基因型差异。从众多种质材料中可以筛选出适宜在轻度Cd、Pb污染地区种植的水稻品种，并可为培育抗重金属污染水稻新品种提供重要的种质材料。
2019, 34(5): 516-524.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.003
摘要:
目的 获取紫背天葵花青素合成代谢核心酶系列信息，为进一步从事紫背天葵或其他特色植物中花青素合成代谢相关基础研究提供依据。 方法 以紫背天葵为材料，以其近缘种白子菜为对照，进行转录组测序分析。 结果 在获取的80 798条单基因簇中，通过8个数据库比对分析，共有43 369条注释到相关信息。这些单基因簇在NR及Swiss-Prot这2个数据库中注释到花青素合成代谢相关系列酶为104个，具体包括10个查尔酮合成酶、5个查尔酮异构酶、36个黄烷酮3-羟化酶、19个二氢黄酮醇4-还原酶、9个花青素合成酶和25个类黄酮3-O-糖基转移酶。通过FPKM均值统计分析可知，这6大家族酶在该两种野菜中表达量差异明显的分别有1、1、3、4、2、4个。在这15个差异表达明显基因中，上调基因7个、下调基因8个。 结论 获取的紫背天葵及其近缘种白子菜中的104个相关酶系列信息中，有15个与紫背天葵花青素合成代谢密切相关。
2019, 34(5): 525-533.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.004
摘要:
目的 较为准确地揭示晾晒烟种质间的遗传关系，提高晾晒烟种质资源的利用率和育种效率。 方法 利用ISSR分子标记技术对36份晾晒烟种质资源进行遗传多样性分析。 结果 从100个ISSR引物中筛选出7条多态性好的引物，扩增出113个条带，其中91条多态性条带，多态性条带比例有80.5%；ISSR标记有效等位基因数（Ne）的平均值为1.64，Nei's基因多样性指数（H）的平均值为0.37，Shannon's信息指数（I）值的平均值为0.55，表明ISSR标记具有较高的多态性检测效率；聚类分析结果表明36份晾晒烟种质间的遗传相似性系数（GS）为0.74~0.91，品种间遗传多样性水平较低，以0.78处作为截值可以划分为5个组；数字指纹图谱可以较为有效地将供试材料进行区分。 结论 ISSR标记适合用于构建晾晒烟的DNA指纹图谱，可以为晾晒烟的品种鉴定提供科学依据。
2019, 34(5): 534-543.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.005
摘要:
目的 鉴定半高丛蓝莓的耐盐性和耐盐范围，为盐碱地区的蓝莓引种、栽培提供理论依据。 方法 采用盆栽加盐的方式进行人工模拟盐胁迫环境，研究不同浓度[0（CK）、30、60、90、120、150、180、210 mmol·L-1]NaCl处理50 d对2年生半高丛蓝莓品种北陆（Northland）的生物学特性、生理生化指标、光合作用以及其净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）、胞间二氧化碳浓度（Ci）和气孔导度（Gs）等光响应的影响。 结果 （1）30、60、90 mmol·L-1NaCl处理对蓝莓生长发育有促进作用；120 mmol·L-1NaCl处理下蓝莓促进作用解除，生长势与CK相近；150、180 mmol·L-1NaCl处理下蓝莓促进作用解除；210 mmol·L-1NaCl为半高丛蓝莓的耐盐存活临界浓度，导致植株死亡；（2）在NaCl浓度≤90 mmol·L-1时，蓝莓植株生长状况优于CK，株高、冠幅增加，地上部、地下部干鲜重增加；蓝莓叶片可溶性糖含量增加，脯氨酸（Pro）含量增加，超氧化物歧化酶（SOD）活性增加，细胞膜相对透性增大，丙二醛（MDA）含量升高；（3）各处理下蓝莓植株Pn、Tr、Gs的日变化曲线呈上升趋势，Ci呈下降趋势，Pn、Tr、Ci的光响应曲线呈上升趋势，Gs呈下降趋势，以60 mmol·L-1NaCl处理最为显著。 结论 半高丛蓝莓具有一定的耐盐性，耐NaCl范围为0~180 mmol·L-1；盐碱地区土壤含盐量低于90 mmol·L-1时，可以考虑选择蓝莓品种北陆种植。
2019, 34(5): 544-550.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.006
摘要:
目的 为进一步探讨刺齿报春苣苔酮脂酰-辅酶A合成酶基因的分子结构和功能，并为刺齿报春苣苔适应极端干旱环境提供分子依据。 方法 总RNA的提取采用改良Trizol法，通过转录组测序获得与刺齿报春苣苔（Primulina spinulosa）抗旱及应对生物胁迫反应有关的基因：酮脂酰-辅酶A合成酶基因，并运用DNAman、Finder、TMPRED、SWISS-MODEL、NetPhos2.0、SignaIP4.1等软件对序列的开放阅读框（ORF）、编码氨基酸、编码蛋白质等理化特性进行分析，并构建系统发育树。 结果 序列分析结果表明，该基因全长1 935 bp（GenBank登录号为MH543314），开放阅读框（ORF）为1 599 bp，共编码532个氨基酸，编码蛋白质的分子量为59.82 kDa，理论等电点（pI）为9.16，为亲水性蛋白，含7个跨膜区，30个可能的磷酸化位点，1个与查尔酮合成酶家族蛋白相同的保守结构域；它与同科旋蒴苣苔（Dorcoceras hygrometricum，KZV37788）的同源性高达92%，两者在系统进化树上聚为一支。 结论 酮脂酰-辅酶A合成酶基因与刺齿报春苣苔叶表面的蜡质合成有关，对植物的抗旱及应对生物胁迫发挥重要调控作用。
2019, 34(5): 551-559.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.007
摘要:
目的 为山茶花科学引种和育种目标性状的选择提供参考。 方法 运用相关性分析和主成分分析法提取影响山茶花观赏性的关键因子，对28个山茶花品种进行观赏价值的综合评价与观赏品种的筛选，构建观赏价值综合评价模型。 结果 山茶花各观赏性状之间存在显著相关性，花量、瓣数与花期呈极显著正相关，花色与新叶色呈极显著正相关；13个性状可综合为花量因子、花期因子、花径因子、色彩因子和叶形因子等5个主成分，累积贡献率达85.48%，具有生物学意义；28个品种评为3个等级，筛选出金碧辉煌、花宝珠、花鹤翎、花芙蓉、正黄旗、黄的旋律、小桃红、红叶贝拉、杰作等9个观赏价值Ⅰ级的品种，评价结果与实地观测效果基本一致。 结论 山茶花观赏价值主要受花量、花期、花径、色彩和叶形等因子的综合影响，花量和花期是最关键的影响因子，要重点选择花大色艳、花量丰富、花期长，或具彩叶特征，整体观赏性强的品种作为推广栽培或育种的优良亲本材料。
2019, 34(5): 560-566.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.008
摘要:
目的 通过探究水晶种杨梅果实生长过程中各生理生化指标变化，明确其动态变化规律以及性状间的相关性，以期找到反映果实成熟的特征指标。 方法 以白梅类水晶种为试材，分别测定从幼果期开始的连续18个采样日期的果实色差参数、单果质量、纵径、横径、果形指数、可溶性固形物（TSS）、可溶性糖、有机酸含量等15个指标的动态变化，并分析了各指标间的相互关系。 结果 果实发育过程中，水晶种的L*缓慢增大直至稳定；a*/b*由负值增大为接近于0的正值后继续缓慢上升；单果质量、纵径和横径均呈不断增大的趋势；TSS、果糖和葡萄糖含量均在果实发育后期迅速积累并达到最大值；苹果酸含量先上升后下降再上升，柠檬酸和草酸含量在果实发育后期呈下降趋势。品质间相关性分析结果显示L*和a*/b*分别与TSS和蔗糖含量之间呈显著性正相关，与草酸之间呈极显著性负相关；果实单果质量、纵径、横径与TSS、果糖、葡萄糖、蔗糖之间呈极显著正相关，与柠檬酸、草酸之间呈极显著负相关。 结论 表明了L*、a*/b*等色差参数和单果质量、纵径、横径等质量相关性状与果实内在品质指标关系密切，可作为反映水晶种白杨梅果实发育进程的特征指标，为其适时采收提供参考依据。
2019, 34(5): 567-574.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.009
摘要:
目的 筛选产多糖光合菌，为开发廉价易制备的益生菌多糖及应用提供参考。 方法 从虾塘中筛选一株产多糖的光合菌HP1，进行生理生化鉴定和16S rDNA序列比对。通过醇沉的方式从发酵液中制备光合菌HP1粗多糖，拌喂乌鳢30 d，以黄芪多糖作为参照，分别对比各个试验组对乌鳢肌肉营养成分的影响。 结果 HP1为粪红假单胞菌Rhodopseudomonasfaecalis。HP1胞外多糖组对乌鳢肌肉pH值没有显著影响（P>0.05），但能显著降低肌肉失水率并促使肌纤维直径变细（P < 0.05）。拌喂HP1胞外多糖对乌鳢粗蛋白含量无显著影响（P>0.05），但对乌鳢肌肉中的氨基酸组成有显著影响（P < 0.05），分别提高乌鳢肌肉中的总氨基酸、必需氨基酸、呈味氨基酸含量8.7%、11%、9%。另外，拌喂HP1胞外多糖也分别提高了乌鳢肌肉的粗脂肪含量、二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）总含量10.7%和12.8%，显著提高肌肉中n-3与n-6系列脂肪酸比值。 结论 拌喂HP1胞外多糖不仅提高乌鳢肌肉的食用口感，也提升了乌鳢肌肉的营养价值，其效果与黄芪多糖拌喂的效果相似。
2019, 34(5): 575-580.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.010
摘要:
目的 明确猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌和大肠杆菌的抑菌作用，为新型抗菌药物的研发和猪源抗菌肽的生产应用提供科学依据。 方法 以猪源抗菌肽为材料，采用液体培养基抑制测定法，结合体内外试验，分别测定猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌和禽源大肠杆菌的抗菌活力值，研究其体内外抑菌作用。 结果 对不同浓度的抗菌肽抗菌活力值的测定结果表明，与0.5、0.2和0.1 mg·mL-1的猪源抗菌肽相比较，1.0 mg·mL-1的抗菌肽对含有106 CFU·mL-1的菌液抑菌效果最好；与阿莫西林、红霉素、四环素等15种抗生素相比较，猪源抗菌肽对禽源沙门氏菌FJS13株和禽源大肠杆菌FJE61株的抑菌圈最大，其抗菌效果最好；抗菌肽在雏鸡体内的抑菌试验表明，攻毒鸡皮下注射猪源抗菌肽有利于提高雏鸡的存活率，在雏鸡体内也具有一定的抑菌作用。 结论 猪源抗菌肽可用于抑制禽源沙门氏菌和大肠杆菌。
2019, 34(5): 581-586.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.011
摘要:
目的 为明确陕西省不同地区油菜根肿菌的致病性，筛选抗根肿病的油菜种质资源。 方法 采用根部注射的室内接种发病方法，对陕西省4个不同地区油菜根肿菌的致病性和15份甘蓝型油菜品种的根肿病抗性进行鉴定。 结果 来源于陕西省西乡县、南郑县、勉县和太白县的油菜根肿菌的致病性存在显著差异，其中勉县根肿菌的致病性最强，南郑县根肿菌的致病性最弱。参试的15个油菜品种的抗性存在显著差异，引进的5个抗性资源华杂62R、华双5R、1628A×根抗、171R和172R的根肿病抗性显著高于陕西省的10个栽培品种。聚类分析结果显示引进的5个抗性资源聚为抗病一类，陕西省的10个栽培品种聚在感病一类。 结论 陕西省4个地区根肿菌存在生理小种差异。引进的5个抗根肿病资源对这4个地区根肿菌均表现为较强的抗性，可以作为当地根肿病病区主栽品种及育种的抗性资源。
2019, 34(5): 587-594.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.012
摘要:
目的 优化嘉宝果叶片总多酚的提取工艺，检测优化提取后的嘉宝果叶片提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。 方法 利用超声波辅助与乙醇提取相结合的方法，以总多酚提取量为考察指标，采用单因素及正交试验，研究功率、时间、乙醇体积分数、料液比和温度对嘉宝果叶片总多酚提取量的影响，并采用酶动力学及紫外可见吸收光谱法探讨叶片提取物体外抑制α-葡萄糖苷酶的活性。 结果 嘉宝果叶片总多酚的最佳提取工艺为：功率120 W，时间10 min，乙醇体积分数40%，料液比1:160（g:mL），温度40℃，在此条件下，嘉宝果叶片总多酚质量分数可达33.84%。优化提取后的嘉宝果叶片提取物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用，半数抑制浓度IC50为0.003 1 mg·mL-1，阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度IC50为8.110 8 mg·mL-1；Lineweaver-Burk双倒数作图显示嘉宝果叶片多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制类型为反竞争性抑制。 结论 正交实验法优化嘉宝果叶片总多酚提取具有可行性，嘉宝果叶片总多酚对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用，可作为降血糖功能因子进行开发利用。
2019, 34(5): 595-599.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.013
摘要:
目的 制备红景天苷单克隆抗体，建立红景天苷间接竞争酶联免疫方法，实现经济、高效、简便快速批量检测红景天药材及其制品中的红景天苷含量，为其商品化检测试剂盒开发奠定基础。 方法 用已经成功偶联的红景天苷-BSA作为免疫原，免疫6~8周龄Balb/c小鼠，ELISA检测血清效价，取效价最高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合，经有限稀释法筛选、克隆后获得能够稳定产生红景天苷单克隆抗体的细胞株，体内诱生腹水制备大量红景天苷单克隆抗体。利用该抗体，建立红景天苷间接竞争酶联免疫分析方法并进行方法学确认，包括日内精密度、日间精密度、回收率等指标。 结果 建立的间接竞争酶联免疫吸附分析方法的线性范围为4.07~598.45 ng·mL-1，检测限IC10为1.77 ng·mL-1，半数抑制率IC50为49.33 ng·mL-1，日内精密度和日间精密度均小于4.5%，加标样品的平均回收率为94.3%，红景天苷含量检测结果与高效液相色谱法一致。 结论 本研究成功制备了红景天苷单克隆抗体，建立了间接竞争酶联免疫分析方法，能够用于为红景天苷含量的快速检测提供依据。
2019, 34(5): 600-605.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.014
摘要:
目的 构建分泌表达α-环糊精葡萄糖基转移酶（α-CGTase）的重组枯草芽胞杆菌，实现α-CGTase的安全高效表达。 方法 通过PCR法扩增嗜热地芽胞杆菌α-CGTase基因，运用EcoR Ⅰ/Xho Ⅰ分别对α-CGTase基因及pBES进行双酶切，然后将该基因片段插入到大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭载体pBES中，再电转化法转化枯草芽胞杆菌RIK1285；对重组枯草芽胞杆菌B.subtilis RIK1285/pBE-CGT发酵条件进行探索。 结果 （1）利用发酵培养基分泌表达α-CGTase，重组枯草芽胞杆菌工程菌B.subtilis RIK1285/pBE-CGT发酵上清液产酶达到2.9 U·mL-1。（2）TB为最适发酵培养基（配方：甘油0.5%，蛋白胨1.2%，酵母粉2.4%，K2HPO4 1.64%，KH2PO4 0.23%）；在初始pH 6.5，温度为37℃下，摇瓶发酵培养24 h后，α-环糊精酶的环化活性达到5.3 U·mL-1，是野生菌株嗜热地芽胞杆菌（0.66 U·mL-1）的8倍。 结论 成功构建了枯草芽胞杆菌B.subtilis RIK1285/pBE-CGT工程菌，并确定其最适发酵培养基和培养条件。
2019, 34(5): 606-612.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.015
摘要:
目的 加强对集约经营油茶林科学、有效的施肥管理，提高林地内养分含量，增加油茶产量。 方法 通过试验设置对照（CK）、农用复合肥（NFF）、专用复合肥（ZFF）、专用有机肥（ZYJ）4个处理，探究施用不同类型肥料对油茶林地土壤氮库和油茶产量的影响。 结果 不同类型肥料的施用对油茶林地土壤氮库中的全氮含量、碱解氮含量、硝态氮与铵态氮含量、可溶性有机氮含量和微生物量氮含量均产生了显著的影响。不同类型肥料对叶片氮含量和鲜果产量也产生了显著的影响。不同类型肥料对油茶林地硝态氮含量的影响，农用复合肥的效果最佳；而对油茶林地其他氮素含量的影响，专用有机肥的效果最好；对油茶叶片全氮含量和鲜果产量的影响，专用有机肥的效果最好。三种不同类型肥中专用有机肥对油茶林地土壤氮素含量的增加效果最为显著，同时对油茶鲜果产量的提高最多。通过相关性分析，土壤全氮和叶片全氮之间存在极显著正相关，与油茶鲜果产量之间存在显著正相关；叶片全氮和鲜果产量之间存在显著正相关。 结论 在油茶林地施肥类型选择上推荐ZYJ。
2019, 34(5): 613-620.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.016
摘要:
目的 研究不同比例砒砂岩添加对风沙土（沙）中碳氮比垂直分布规律的影响，为沙荒地改良以及复配土体地力的提升提供科学依据。 方法 以位于陕西富平的砒砂岩与沙复配比小区为研究对象，选择砒砂岩与沙体积比分别为0:1（CK）、1:5（C1）、1:2（C2）和1:1（C3）的4个处理，分析复配土碳氮比（C/N）及其与土壤养分和质地的关系。 结果 不同处理下土壤有机碳和全氮含量随着土层深度的增加而降低，有机碳平均值为1.45~2.70 g·kg-1且0~10 cm土层有机碳含量显著高于20~30 cm土层（P < 0.05）；复配比单因素对有机碳产生显著影响，随着砒砂岩体积分数的增加，0~10 cm土层有机碳含量以C3处理最高。全氮平均值为0.28~1.31 g·kg-1，且0~10 cm土层全氮含量显著高于10~20 cm和20~30 cm土层，在0~10 cm土层中，C3处理的全氮含量显著高于其他处理，复配比和土层双因素对全氮均产生显著影响。C/N平均值为1.72~5.92，以0~10 cm最低，其值随着砒砂岩体积分数的增加而依次减小，以C3处理最为显著。硝态氮和铵态氮含量在各处理间的变化规律较为一致，平均值分别为33.56~197.00、5.51~70.02 mg·kg-1，以0~10 cm土层含量最高。砂粒含量随着土层的加深而逐渐增加，粉粒和黏粒则随着土层的加深而减少，随着砒砂岩体积分数的增加，土壤质地由砂土变为壤砂土再变为砂壤土。C/N与硝态氮和铵态氮均呈显著负相关关系，与土壤质地的颗粒组成也有一定的相关性，10~20 cm土层最为显著。 结论 砒砂岩与沙复配比为1:1时可以促进0~10 cm表层土壤碳氮的积累，增强微生物的分解作用。
