Pathogenicity of Serotype O78 Avian Pathogenic Escherichia coli Isolated from Chicken and the Protective Effect of Butyric/Propionic Glycerides
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摘要:目的 研究O78血清型大肠杆菌对蛋鸡的致病性，以及单甘油酯对蛋鸡O78血清型大肠杆菌不同致病方式的保护效果，为绿色无抗养鸡提供理论支撑和实践经验。方法 对福建省某鸡场分离的血清型O78禽源致病性大肠杆菌（APEC），采用口服、颈部皮下和气管内壁接种不同日龄的试验鸡，评价菌株的致病性，建立攻毒模型，然后评估以丙酸单甘油酯、丁酸单甘油酯为主要成分的水溶性液态添加物FraC34对鸡大肠杆菌病的保护效果。结果 （1）12日龄海兰蛋鸡雄雏口服接种细菌3.0×109CFU·羽-1，可造成100%发病；但22日龄海兰蛋鸡雄雏分别口服接种细菌3.0×109CFU·羽-1和6.0×109CFU·羽-1时不发病。12日龄海兰蛋鸡雄雏颈部皮下接种细菌0.4×109CFU·羽-1，可造成70%的试验鸡发病，22日龄海兰蛋鸡雄雏气管内壁接种细菌1.5×109CFU·羽-1，可造成25%鸡只发病；（2）在饮水中添加FraC34，早期可改善鸡肠道健康，降低肠道对APEC的易感性，在饮水中添加2~3 L·m-3的FraC34，能够显著降低经由口服途径感染APEC造成的发病率和死亡率，还能够降低经气管内壁接种APEC所造成的死亡率，并且显著降低发病率；当饮水添加3 L·m-3时，可以维持感染鸡的日增重。结论 鸡O78血清型的APEC对幼雏具有极大的危害性，造成严重经济损失，而中大雏对该菌株具有一定的耐受性；养殖环节添加FraC34，对于鸡感染APEC具有一定的保护作用，并且可以维持鸡的生产性能，可替代部分抗生素的使用，达到较为理想的保护效果。Abstract:Objective Studying the pathogenicity of serotype O78 Escherichia coli to laying hens with different inoculation methods and the protective effects of single glycerides could provide theoretical support and practical experience for green no-antibiotic chicken breeding.Method The virulence of serotype O78 avian pathogenic Escherichia coli (APEC) strain isolated from a chicken farm in Fujian province was evaluated by oral, subcutaneous and intratracheal inoculation, and the protective effect of water-soluble liquid additive FraC34, composed of butyric and propionic acid monogly cerides, was evaluated in Hy-line laying hens.Result The results showed that:(1)With oral inoculation of 3×109CFU bacteria per chicken, the morbidity was 100% for 12-days old Hy-line laying hens, but no disease detected for 22-days old ones with oral inoculation of 3×109 or 6×109CFU bacteria per chicken. When the 12-days old chicken were inoculated subcutaneously with 0.4×109CFU bacteria per chicken, the rate of the sick was 70%, and 25% for 22-days old ones when inoculated intracheally with 1.5×109 CFU bacteria per chicken. (2)Adding FraC34 in drinking water of laying hens could improve the intestinal tract and reduce the susceptibility to APEC in the early stage. The addition of 2.0-3.0 L·m-3 FraC34 in drinking water could significantly reduce the morbidity and mortality rate for chickens infected with APEC by oral inoculation and mortality rate of which with intratracheal inner wall inoculation.The daily gain of chicken could be maintained when treated by 3.0 L·m-3 FraC34.Conclusion The serotype O78 APEC strain was pathogenic to young chicks and led to serious economic losses, but not susceptible for older chicken.FraC34 had protective effect and could maintain the production performance of the chicken infected with APEC, which could be applied instead of some antibiotics for efficient production of poultry.
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0. 引言
【研究意义】蕹菜（Ipomoea aquatica Forsk），又名空心菜、通菜，为旋花科（Convolvulaceae）番薯属（Ipomoea）一年或多年生湿生蔓状草本植物，原产于东亚，在热带地区和亚热带地区广泛种植，是一种重要的水生经济植物[1]。蕹菜富含多种营养元素，不仅对人类和动物具有很高的营养价值，还具有药用价值[2–4]，据研究表明食用蕹菜可以减轻体虚、黄疸[4]、流鼻血和高血压等症状[5]，并且蕹菜的提取物已被报道能够抑制前列腺素合成[6]，并具有抗糖尿病[7]、抗氧化[8]和抗癌活性[9]。目前在我国普遍栽培于长江流域及以南地区[10]，然而近年来新发现的蕹菜溃疡病对蕹菜种植产业造成了严重影响，因此，建立快速准确的蕹菜溃疡病菌检测方法对蕹菜溃疡病的早期诊断以及有效防控具有重要意义。【前人研究进展】蕹菜溃疡病是由穿孔黄单胞菌（Xanthomonas perforans）引起的一种细菌性病害[10]，在福建、广东等地发生日益严重。蕹菜叶片受到病原菌侵染时，初期症状为叶背出现油滴状凸起的透明斑点，叶面出现褪绿扁平斑点，边缘有不规则黄晕，随后病斑变大，逐渐扩张，并变为棕色，严重时叶片卷曲变形，叶面病斑棕色坏死，叶背斑点边缘凸起中间凹陷，呈火山口状溃疡斑[11]。该病害在不同的蕹菜品种上均有发生，严重时发病率高达100%，展开不久的心叶等可食部分也有病斑，丧失商品性，对蕹菜的生产带来了严重影响，给菜农造成了巨大的经济损失。当前病害诊断主要通过辨识叶部病斑，但是这种原始的诊断方法不利于病害的早期诊断和预警，错失病害防控良机。基于病原菌基因组特异序列设计引物进行分子检测不仅可应用于田间病害的正确诊断，还能满足种子潜伏期以及土壤、水体病原菌检测的需求。PCR检测技术是最常用的植物病原菌分子检测方法，具有成本低、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，已在植物组织及土壤病原菌检测方面得到了广泛运用[12]。【本研究切入点】目前对于蕹菜溃疡病的分子检测技术还有待深入探讨。【拟解决的关键问题】针对蕹菜溃疡病的病原菌X. perforans基因组中的特有序列设计了两对特异性检测引物，旨在为蕹菜溃疡病的田间早期检测、病害诊断以及有效的防控策略提供重要技术支撑。
1. 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试菌株
主要菌株：来自广东东莞的蕹菜溃疡病病原菌X. perforans TC2-1，来自福建厦门的蕹菜溃疡病病原菌X. perforans 829-1。其他菌株：来自韶关的红掌细菌性疫病病原菌X. axonopodis pv. dieffenbachiae Xad8，实验室保存的野油菜黄单胞杆菌X. campetris pv. campetris Xcc1、芒果露水斑病菌X. citri pv. mangiferaeindicae Xcm、柑橘溃疡病菌X. citri subsp. citri Xac、水稻白叶枯病菌X. oryzae pv. oryzae PXO99A，以及来自加拿大的豌豆细菌性疫病菌Pseudomonas syringae pv. pisi 1314和丁香假单胞菌P. syringae pv. tomato DC3000。
1.1.2 样本收集
分别于2022年7月5日和15日对表1、2中的蕹菜种植区进行土样、水样、植株的采集。土样和植株采取5点取样法进行取样，土样每点各采5 g，合并装入封口袋；植株每点各采2株，合并装入封口袋；水样则随机选取3个点（优先从田块中取水样，其次排水口，如果田块中和排水口均无水层，则从进水口取样），每点各取水样5 mL，合并装入密封瓶。在东莞、深圳两地的蕹菜种植地区收集了两批样品，第一批收集了土样、水样各20份，植株样本22份，第二批收集了土样、水样、植株样本各23份，样本详细信息见表1、2。
表 1 第一批样本采样信息及检测结果（2022年7月5日）Table 1. Information and detection of canker disease in 1st sampling on July 5, 2022序号
No.采样时期
Plant stage采样地点
Sampling location土样
Soil sample水样
Water sample叶样
Leaf sampleA 苗期 深圳市光明区玉塘街道玉律社区望家欢菜场 1（−） 1（−） 1（−） B 苗期 深圳市宝安区航城街道黄麻布社区湖尔美菜场 1（−） 1（−） 1（−） C 临近采收期 深圳市光明区玉塘街道玉律社区望家欢菜场 1（−） 1（−） 1（−） D 临近采收期 深圳市宝安区航城街道黄麻布社区湖尔美菜场 1（−） 1（−） 1（−） E 苗期 东莞市高埗镇三联村三队对面海 0 0 1（−） F 苗期 东莞市高埗镇保安围村三队高低卅贝 0 0 1（−） G 苗期 东莞市万江区大汾社区万江家兴蔬菜种植专业合作社 1（−） 1（−） 1（−） H 苗期 东莞市万江区大汾社区万江家兴蔬菜种植专业合作社 1（−） 1（−） 1（−） I 苗期 东莞市谢岗镇黎村担水沥 1（−） 1（−） 1（+） J 苗期 东莞市谢岗镇黎村担水沥 1（−） 1（−） 1（+） K 苗期 东莞市大岭山镇大沙村浪尾浦蔬菜生产基地 1（−） 1（−） 1（−） L 苗期 东莞市大岭山镇大沙村浪尾浦蔬菜生产基地 1（−） 1（−） 1（−） M 临近采收期 东莞市东坑镇初坑村一队 1（−） 1（−） 1（−） N 临近采收期 东莞市东坑镇农业园正门益品原农场 1（−） 1（−） 1（−） O 苗期 东莞市桥头镇石水口村牛埔 1（−） 1（−） 1（−） P 苗期 东莞市桥头镇迳联社区草埔 1（−） 1（−） 1（−） Q 苗期 东莞市麻涌镇沥黎滘村菜地 1（−） 1（−） 1（+） R 苗期 东莞市麻涌镇蒲基村菜地 1（−） 1（−） 1（+） S 苗期 东莞市石碣镇四甲村叶屋基生产基地 1（−） 1（−） 1（−） T 苗期 东莞市石碣镇四甲村叶屋基生产基地 1（−） 1（−） 1（−） U 苗期 东莞市道滘镇蔡白村菜地 1（−） 1（−） 1（−） V 苗期 东莞市道滘镇大鱼沙村菜地 1（−） 1（−） 1（+） 表中数字代表样本数，+代表检测结果为阳性，−代表检测结果为阴性。表2同。
The numbers in the table represent the number of samples, + represents a positive test result, and −represents a negative test result. Same for table 2.表 2 第二批样本采样信息及检测结果（2022年7月15日）Table 2. Information and detection on canker disease in 2nd sampling on July 15, 2022序号
No.采样时期
Plant stage采样地点
Sampling location土样
Soil sample水样
Water sample叶片
Leaf sampleA 苗期 深圳市光明区新湖街道新羌社区绿田菜场 1（+） 1（−） 1（+） B 临近采收期 深圳市光明区新湖街道新羌社区绿田菜场 1（+） 1（+） 1（+） C 临近采收期 深圳市宝安区燕罗街道燕川菜场 1（+） 1（+） 1（+） D 收获期 东莞市高埗镇三联村三队对面海 1（+） 1（+） 1（+） E 收获期 东莞市高埗镇保安围村三队高低卅贝 1（+） 1（+） 1（+） F 临近采收期 东莞市万江区大汾社区万江家兴蔬菜种植专业合作社 1（+） 1（−） 1（−） G 临近采收期 东莞市万江区大汾社区万江家兴蔬菜种植专业合作社 1（−） 1（−） 1（+） H 临近采收期 东莞市谢岗镇黎村担水沥 1（−） 1（−） 1（+） I 临近采收期 东莞市谢岗镇黎村担水沥 1（+） 1（−） 1（+） J 临近采收期 东莞市大岭山镇大沙村浪尾浦蔬菜生产基地 1（−） 1（−） 1（+） K 临近采收期 东莞市大岭山镇大沙村浪尾浦蔬菜生产基地 1（+） 1（+） 1（+） L 苗期 东莞市东坑镇初坑村一队 1（−） 1（−） 1（+） M 苗期 东莞市东坑镇农业园正门益品原农场 1（−） 1（+） 1（+） N 临近采收期 东莞市桥头镇石水口村牛埔 1（+） 1（−） 1（+） O 临近采收期 东莞市桥头镇迳联社区草埔 1（+） 1（−） 1（+） P 临近采收期 东莞市麻涌镇沥黎滘村菜地 1（−） 1（−） 1（+） Q 临近采收期 东莞市麻涌镇蒲基村菜地 1（−） 1（−） 1（+） R 临近采收期 东莞市石碣镇四甲村叶屋基生产基地 1（−） 1（−） 1（+） S 临近采收期 东莞市石碣镇四甲村叶屋基生产基地 1（−） 1（−） 1（+） T 临近采收期 东莞市道滘镇蔡白村菜地 1（+） 1（+） 1（+） U 临近采收期 东莞市道滘镇大鱼沙村菜地 1（+） 1（−） 1（+） V 临近采收期 东莞市厚街镇厚街村厚街菜地 1（+） 1（+） 1（+） W 临近采收期 东莞市厚街镇涌口村涌口菜地 1（+） 1（+） 1（+） 1.2 试验方法
1.2.1 蕹菜溃疡病菌特异性检测引物的设计
通过比较NCBI数据库中所有的黄单胞菌株基因组序列与蕹菜溃疡病的病原菌穿孔黄单胞菌（X. perforans）的基因组序列，针对X. perforans基因组中的特有序列（TC2-1_002562基因编码噬菌体终止酶大亚基家族蛋白，TC2-1_002580基因编码噬菌体家族蛋白）设计了两对检测引物：XP-F1（5′-GTACCTAAAGGCGATCATGGAC-3′），XP-R1（5′-CTTCGTCGAGGAATAGGTAACG -3′）；XP-F2（5′-ATGCGATGTATGCGACCTACAC-3′），XP-R2（5′-CTTGGTCGGAATGAACGGGAAC-3′）。
1.2.2 引物特异性检验
以1.1.1中的主要菌株基因组DNA为正对照，其他菌株基因组DNA为负对照，利用1.2.1的两对特异性引物进行普通PCR扩增及凝胶电泳检测。基因组DNA提取方法参考文献[10]。
PCR反应体系（25 μL）：2×PCR Mix 12.5 μL，引物（100 μmol·L−1）XP-F1/R1各1 μL，XP-F2/R2各0.4 μL，DNA模板（10-100 ng）1 μL，加ddH2O补足25 μL。PCR反应程序：94 ℃预变性5 min；94 ℃变性30 s，52 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，30个循环；72 ℃延伸10 min，4 ℃保存。
制备1%的琼脂糖凝胶，取5 μL PCR扩增产物和1 μL电泳缓冲液混匀，用DNA Marker DL2000作为分子量标记，进行电泳分析并拍照记录电泳结果。
1.2.3 引物灵敏性检验
提取X. perforans TC2-1基因组DNA，DNA用量分别为100、50、25、10、5、1、0.1、0.05、0.025、0.01、0.005、0.001 ng，以其为模板，用1.2.2的PCR反应体系和条件进行特异片段扩增及凝胶电泳检测，并拍照记录电泳结果。
1.2.4 田间样品检测
对采集到的样本进行处理，其中对水体样本进行离心后，取100 μL沉淀加入1 mL LB培养液28 ℃，200 r·min−1摇菌培养；土壤样本充分混匀后，取1 g加入1 mL LB培养液28 ℃，200 r·min−1摇菌培养；取叶片（有典型溃疡症状的取该部分叶片，无症状的随机取）样本加入10 mL LB培养液28 ℃，200 r·min−1摇菌培养。
所有样本过夜培养后，取1 μL作为模板，加入XP-F1/R1和XP-F2/R2检测引物，用Taq Mix进行普通PCR扩增；以ddH2O为负对照，以X. perforans TC2-1的基因组DNA为正对照。PCR反应体系、反应程序和电泳操作同1.2.2。
2. 结果与分析
2.1 引物特异性
如图1所示，利用XP-F1/R1和XP-F2/R2两对引物进行普通PCR扩增，结果表明，分离自东莞和厦门蕹菜溃疡病病样的两株细菌TC2-1和829-1均可以扩增出374 bp和674 bp的特异条带，而其他黄单胞菌和假单胞菌株均扩增不出蕹菜溃疡病菌的特异条带，表明所设计两对引物对蕹菜溃疡病菌具有良好的特异性。
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图 1 XP-F1/R1和XP-F2/R2的特异性检验结果M：DL2000 DNA marker；TC2-1、829-1代表来源于广东和福建的蕹菜溃疡病病原菌，Xad代表红掌细菌性疫病病原菌，Xcc代表野油菜黄单胞杆菌，Xcm代表芒果露水斑病菌，Xac代表柑橘溃疡病菌，Xoo代表水稻白叶枯病菌，Psa代表豌豆细菌性疫病菌，Pst代表丁香假单胞菌。Figure 1. Specificity of detection on X. perforans using XP-F1/R1 and XP-F2/R2 primersM: DL2000 DNA marker; TC2-1 and 829-1: X. perforans strains isolated from diseased water spinach leaves in Guangdong and Fujian, respectively; Xad: X. axonopodis pv. dieffenbachiae ; Xcc: X. campetris pv. campetris; Xcm: X. citri pv. mangiferaeindicae; Xac: X. citri subsp. citri; Xoo: X. oryzae pv. oryzae; Psa: P. syringae pv. pisi; Pst: P. syringae pv. tomato.2.2 引物灵敏性
利用不同的X. perforans TC2-1基因组DNA作为模板进行普通PCR扩增，结果可知，当DNA模板为0.001 ng时，引物XP-F1/R1可扩增出条带，而引物XP-F2/R2在DNA模板为0.025 ng的情况下仍可扩增出条带，表明两对引物的扩增灵敏性很高，其中引物XP-F1/R1的灵敏性优于XP-F2/R2（图2）。
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图 2 XP-F1/R1和XP-F2/R2的灵敏性检验结果M：DL2000 DNA marker；不同孔代表模板为不同浓度的蕹菜溃疡病病原菌X. perforans TC2-1基因组DNA。Figure 2. Sensitivity of detection on X. perforans using XP-F1/R1 and XP-F2/R2 primersM: DL2000 DNA marker; different concentrations of X. perforans TC2-1 gDNA were used as templates for PCR amplification.2.3 田间样品检测结果
利用XP-F1/R1和XP-F2/R2对田间采集的样品进行PCR及凝胶电泳检测，结果表明：以ddH2O为负对照扩增不出特异性条带；以X. perforans TC2-1的基因组DNA作为模板进行PCR扩增，能扩增出374 bp和674 bp的特异条带。
检测的第一批样本中，5份植株样本（2份样本来自东莞市谢岗镇黎村担水沥，2份分别采自东莞市麻涌镇的沥黎滘村和蒲基村菜地，1份来自道滘镇大鱼沙村）能检测出与TC2-1同样的特异性条带，而与这5份植株样本采自同一地方的土样和水样以及其他样本均未能扩增出特异条带（图3、表1）。表明这些地区病害的初侵染源可能为植株，而非水体和土壤。
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图 3 利用XP-F1/R1和XP-F2/R2特异性引物对第一批田间样本的PCR检测结果M：DL2000 DNA marker；ddH2O：空白对照；TC2-1：以X. perforans TC2-1基因组DNA为模板进行PCR作为阳性对照；A—V：对应表1中不同采样地点的田间样本；1、2、3分别代表土样、水样和蕹菜叶片。Figure 3. Detection on 1st batch field samples using XP-F1/R1 and XP-F2/R2 primersM: DL2000 DNA marker; ddH2O: blank control; TC2-1: X. perforans TC2-1 gDNA used for PCR template to serve as positive control; A to V: PCR amplicons with different templates corresponding to sampling locations shown in Table 1; 1, 2, and 3: soil, water, and water spinach leaf samples, respectively.检测的第二批样本中，14份土样、9份水样、22份叶片能检测出与TC2-1同样的特异性条带（图4、表2）。除了东莞市万江区大汾社区万江家兴蔬菜种植专业合作社的植株样本检测不到病原菌，其他蕹菜种植区（包括深圳和东莞）的植株均检测到病原菌。两次采样时间相差10 d，从检测结果可以看出，病害发展非常迅速，许多地区的土样和水样均检测出病原菌，表明土壤和水流也是病害流行的重要环节之一。
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图 4 利用XP-F1/R1和XP-F2/R2特异性引物对第二批田间样本的PCR检测结果M：DL2000 DNA marker；ddH2O：空白对照；TC2-1：以X. perforans TC2-1的基因组DNA作为模板进行PCR作为阳性对照；A—W：对应表2中不同采样地点的田间样本；1、2、3分别代表土样、水样和蕹菜叶片。Figure 4. Detection on 2nd batch field samples using XP-F1/R1 and XP-F2/R2 primersM: DL2000 DNA marker; ddH2O: blank control; TC2-1:X. perforans TC2-1 gDNA used for PCR template to serve as positive control; A to W: PCR amplicons with different templates corresponding to sampling locations shown in Table 2; 1, 2, and 3: soil, water, and water spinach leaf samples, respectively.3. 讨论与结论
作为南方重要的经济作物，蕹菜在粤港澳大湾区一年可多次播种和扦插移栽，在东莞市连作田可收割上市10批，每公顷产值高达75万元。因其具有耐雨水冲刷、耐热、虫害为害较少的特点，加上产值较高，所以在邻近消费市场的珠三角地区特别是东莞市，种植面积持续增长，多个镇街蕹菜面积占蔬菜面积比例60%以上。多年来，蕹菜溃疡病持续危害蕹菜生产，已经超过蕹菜白锈病，成为制约当地蕹菜产业的头号病害。而且，前期菜农常将其与白锈病一起视作真菌病害，采用杀真菌剂叶面喷雾来防治，既达不到防控效果，又加重了农药的滥用、浪费并造成污染。还有部分菜农因找不到对口防治药剂而束手无策，在6～9月该病发生高峰期放任自流，或者被迫改种其他蔬菜。
蕹菜溃疡病是由穿孔黄单胞菌（Xanthomonas perforans）引起的[10]。该病原菌主要引起番茄髓部坏死病[13]和辣椒叶斑病[14]。蕹菜是迄今发现的该病原菌的第三个自然寄主。从田间样本的检测结果表明，7月5日送测样本中只在东莞的5份叶片上检测到病原菌，而7月15日检测的样本中，绝大多数的植株、部分土壤和水体均检测到病原菌，说明该病在发病高峰期在东莞、深圳等地发展迅速，蕹菜种子和种苗极可能是该病的初侵染源，种植环境的水、土壤也是病害循环的重要环节。该发现对于今后进一步研究蕹菜溃疡病病害循环规律、制定针对性防控策略具有重要意义。病原菌的早期诊断对于病害防治非常重要，尤其对种植区土壤、水、种子和宿根种苗的快速检测有助于早期诊断和针对性防控。本研究利用双对特异性引物对病原菌进行分子检测，建立的检测方法简单、高效，双特异性条带的检验也避免了假阴性结果的产生，使诊断更加准确。
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表 1 O78血清型APEC接种雄性海兰蛋鸡的接种途径和结果
Table 1 Inoculation methods of chickens with APEC O78 and the survival rate
接种途径
Inoculated
pathway接种日龄
Inoculated
day/d每羽接种剂量
Inoculated
dose/CFU发病率
Morbidity
/%死亡率
Mortality
/%平均死亡时间
Average dead
time/h口服接种 Oral inoculation 12 3.0×109 100 30 127 22 3.0×109 0 0 - 22 6.0×109 0 0 - 颈部皮下接种 Subcutaneous inoculation 12 0.4×109 70 20 126 气管内壁接种 Intratra cheal inoculation 22 1.5×109 25 5 140 注：存活鸡扑杀，剖检见小肠壁变薄，充盈，内容物红染，肠道内壁充血、出血，即判定为发病鸡只。对照组均存活，无发病死亡病例，表 2、3同。
Note: number of disease including:necropsy of survival chicken found thinner small intestinal wall, filling, content red dye, intestinal wall hyperemia, bleeding, was defined the incidence of chicken. The chicken of control group was with no morbidity and mortality. The same as table 2-3.
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表 2 FraC34对12日试验鸡口服接种O78的保护效果
Table 2 Protective effect of FraC34 on 12-days old chicken by oral inoculation with APEC O78
组别
GroupsFraC34 发病率
Morbidity
/%死亡率
Mortality
/%存活鸡平均体重
Average weight of
survival chicken/g体重差异
Difference
of weight/%日龄
Days old用量Dose
/(L·m-3)A1 6 1.0 30b 10b 296.5a 4.96 B1 6 1.5 50a 40a 297.0a 5.13 C1 12 2.0 10b 0b 298.0a 5.49 D1 12 3.0 10b 10b 303.0a 7.26 E1(清水对照) Water (CK) 12 0 100a 30a 282.5b - F1(未攻毒对照)Not attacked(CK) 12 0 0 0b - - 注：同列数据后不同小写字母表示处理间差异显著。表 3同。
Note:Different lowercase letters on a column indicates significant difference at 5%.The same as table 3.
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表 3 FraC34对22日龄试验鸡气管内壁接种O78的保护效果
Table 3 Protective effect of FraC34 on 22-days old chicken by intratracheal inner wall inoculation with APEC O78
组别
GroupsFraC34 发病率
Morbidity
/%死亡率
Mortality
/%存活鸡平均体重
Average weight of
survival chicken/g体重差异
Difference
of weight/%日龄
Days old用量Dose
/(L·m-3)A2 16 1.0 35a 25 375.5b -1.96 B2 16 1.5 35a 10 380.5b -0.65 C2 22 2.0 10b 5 385.0b 0.52 D2 22 3.0 10b 5 394.0a 2.87 E2(清水对照) Water (CK) 22 0 40a 10 383.0b - F2(未攻毒对照)Not attacked(CK) 22 0 0 0 - -
下载: 导出CSV
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[1] CROXEN M A, FINLAY B B. Molecular mechanisms of Escherichia coli pathogenicity[J]. Nature Reviews Microbiology, 2010, 8(1):26-38. DOI: 10.1038/nrmicro2265
[2] SMITH J L, FRATAMICO P M, GUNTHER N W. Extraintestinal pathogenic Escherichia coli[J]. Foodborne Pathogens & Disease, 2007, 4(2):134-163. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zgksszz200908012
[3] JOHNSON T J, LOGUE C M, JOHNSON J R, et al. Associations between multidrug resistance, plasmid content, and virulence potential among extraintestinal pathogenic and commensal Escherichia coli from humans and poultry[J]. Foodborne Pathogens & Disease, 2012, 9(1):37-46. http://d.old.wanfangdata.com.cn/NSTLQK/NSTL_QKJJ0225885774/
[4] LI G, LATURNUS C, EWERS C, et al. Identification of genes required for avian Escherichia coli septicemia by signature-tagged mutagenesis[J]. Infection & Immunity, 2005, 73(5):2818-2827. http://d.old.wanfangdata.com.cn/OAPaper/oai_pubmedcentral.nih.gov_1087346
[5] WANG S, XIA Y, DAI J, et al. Novel roles for autotransporteradhesinAatA of avian pathogenic Escherichia coli: colonization during infection and cell aggregation[J]. Fems Immunology & Medical Microbiology, 2011, 63(3):328-338. http://med.wanfangdata.com.cn/Paper/Detail/PeriodicalPaper_PM22092559
[6] 刘玉涛, 周伦江, 王长兵, 等.闽北地区鸡致病性大肠杆菌的分离与血清型鉴定[J].福建农业学报, 2000, 15(3):51-53. DOI: 10.3969/j.issn.1008-0384.2000.03.009 LIU Y T, ZHOU L J, WANG C B, etal. Isolation and serotype identification of chicken Escherichia coli in northern Fujian[J]. Fujian Journal ofAgricultural Sciences, 2000, 15(3): 51-53. (in Chinese) DOI: 10.3969/j.issn.1008-0384.2000.03.009
[7] 田胜, 王晓云, 刘宝胜.饲料中滥用抗生素的危害及应对措施[J].中国饲料添加剂, 2010(7):5-9. http://www.cqvip.com/Main/Detail.aspx?id=34646754 TIAN S, WANG X Y, LIU B S. Harm and response measures of abusing antibiotics in feedstuff[J]. China Feed Additive, 2010(7):5-9. (in Chinese) http://www.cqvip.com/Main/Detail.aspx?id=34646754
[8] 李宁, 穆淑琴, 闫峻, 等.抗生素替代物在畜牧生产中的应用[J].饲料研究, 2017(17):1-5. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=slyj201717001 LI N, MU S Q, YAN J, et al. Application of antibiotic substitute in animal husbandry[J]. Feed Research, 2017(17):1-5. (in Chinese) http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=slyj201717001
[9] 李红, 孙东弦, 陈瑞旭, 等.添加剂对面包品质的影响及抗老化作用的研究[J].食品工业, 2016(5):5-8. DOI: 10.3969/j.issn.1672-5026.2016.05.002 LI H, SUN D X, CHEN R X, et al. Studies on the effect of additives on bread quality and its anti-aging properties[J]. The Food Industry, 2016(5):5-8. (in Chinese) DOI: 10.3969/j.issn.1672-5026.2016.05.002
[10] NAMKUNG H, YU H, GONG J, et al. Antimicrobial activity of butyrate glycerides toward Salmonella Typhimurium and Clostridium perfringens[J]. Poultry Science, 2011, 90(10):2217-2222. DOI: 10.3382/ps.2011-01498
[11] 张希, 杨明, 宋飞, 等.脂肪酸及其衍生物的抑菌活性[J].浙江大学学报(农业与生命科学版), 2013, 39(2):155-160. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zjdxxb-nyysm201302007 ZHANG X, YANG M, SONG F, et al. Antimicrobial activity of selected fatty acids and their derivatives[J]. Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences), 2013, 39(2):155-160. (in Chinese) http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zjdxxb-nyysm201302007
[12] SAIF Y M.禽病学:第十二版[M].北京:中国农业出版社, 2012:811-863 SAIF Y M.Poultry disease:12ed[M]. Beijing: China Agriculture Press, 2012:811-863. (in Chinese)
[13] 王秋峰, 王振, 刘振伟. AC34单丁/丙酸甘油酯在饲料中的应用浅析[J].中国饲料添加剂, 2014(11):33-35. http://www.cqvip.com/QK/89585X/201411/663015094.html WANG Q F, WANG Z, LIU Z W. Application of AC34 single butyric (propionic) acid glycerides in feed.[J]. China Feed Additive, 2014(11):33-35. (in Chinese) http://www.cqvip.com/QK/89585X/201411/663015094.html
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