Effects of Habitats on Flavonoids and Vitamin B Contents in Ziliangyou 737
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摘要:目的 探索紫黑米品种紫两优737在不同种植季节及不同生境的黄酮及B族维生素的变化差异,进而为生产者最佳种植季节及种植地点安排、提高紫两优737生产品质提供科学依据。方法 收集2021年4月中旬至10月中旬种植于福建12个地方的紫两优737样本,测定其花青素、黄酮、类胡萝卜素和B族维生素含量,并进行主成分分析。结果 晚季和烟后季种植情况下,紫两优737样品中花青素、黄酮和类胡萝卜素含量明显比早季和中季高,且随海拔升高,这3种物质都有上升的趋势;总维生素含量方面,早、晚季种植比中季和烟后季种植含量高,维生素含量与海拔无明显相关关系。主成分分析表明,VB6、VB4、VB5、花青素、黄酮和类胡萝卜素在第一主成分上有较高的载荷,这一部分体现了紫黑米中主要的营养物质。VB3、VB8、VB7在第二主成分上有较高载荷,VB1和VB2则在第三主成分上有较高载荷。样品中得分最高的是宁德岚亭晚季样本,中季样本普遍得分较低。结论 紫两优737的 B族维生素含量VB5、VB1、VB6较高;从种植季节或种植地点而言,晚季种植或光照充足、气温较低的高海拔地区种植的样本均含有较高花青素、黄酮、类胡萝卜素和B族维生素。Abstract:Objective Effects of planting season and location on the flavonoids and B vitamins contents in the purple black rice Ziliangyou 737 were studied.Method Contents of anthocyanins, flavonoids, carotenoids, and B vitamins of the rice specimens collected from 12 localities in Fujian in mid-April to mid-October 2021 were determined and statistically analyzed for principal components.Result The contents of anthocyanins, flavonoids, and carotenoids in grains were significantly higher in the rice planted in the late or post-tobacco season than in the early or middle season. The contents also increased with increasing altitude of the area where the rice was cultivated. On the other hand, vitamins were more abundantly found in the rice planted in the early or late season than in the middle or post-tobacco season, but not significantly affected by elevation. VB6, VB4, VB5, anthocyanin, flavonoid, and carotenoids represented a greater load as the first principal components and were the major nutrients in the rice. The 2nd principal components included VB3, VB8, and VB7, while the 3rd principal components, VB1 and VB2. Overall, the rice planted in the late season from Lanting, Ningde received the highest score among all, while the mid-season rice tended to be low.Conclusion On B vitamins, Ziliangyou 737 contained more VB5, VB1, and VB6 than the others. The rice planted in late season or in areas of high altitude with sufficient sunlight and low temperature appeared to have higher contents of anthocyanin, flavonoids, carotenoids, and B vitamins.
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Keywords:
- Ziliangyou 737 /
- anthocyanins /
- flavonoids /
- carotenoid /
- B vitamins
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0. 引言
【研究意义】水稻是一种重要的粮食作物,全球一半以上人口以稻米为主食。随着社会的进步,人民的膳食结构发生了变化,更加注重营养保健,有色米药食同源的作用慢慢被重视。我国的稻种资源非常丰富,有色米的种类很多。有色米是指种皮带有色泽的水稻,包括黑米、紫米、红米、绿米和黄米等,通常以糙米食用,营养价值较高,具有一定的药用价值。对特种稻种质的成分分析表明,黑米 、紫米、红米、香米、绿米、巨胚米、甜米等种质不仅含有丰富的蛋白质、赖氨酸、脂肪、碳水化合物、维生素、矿质元素、膳食纤维,而且含有黄酮、生物碱、强心疳、花青3-葡萄糖苷等生理活性物质[1]。有色米中的黑米有“珍贡米” “药米”的美誉[2],黑米的微量元素和活性物质含量高,黑米中的黄酮类化合物与黑米的抗氧化能力呈显著正相关[3,4]。黑米中的赖氨酸含量是普通大米的2~2.5倍,植物类脂肪比普通大米高1.9倍[5];黑米的维生素含量是普通大米的1.5~2.4倍,VB1、VB2是普通大米的1.5~6.8倍[6];黑米中含有的钙、铁、锌等比普通大米高5~7倍,还含有被称为“抗癌营养剂”的硒[7-8]。【前人研究进展】我国黑米资源丰富。据赖来展等[9]报道,我国的黑米资源世界领先,达到370多份,品种数占全球资源的90.8%。代表品种有陕西省洋县黑米、云南省西双黑糯、贵州省惠水黑糯、广西容县黑糯和东兰墨米、湖南湘西黑糯、江苏常熟鸭血糯等。但这些品种都存在生育期长、产量低、抗性差、植株高等问题[10]。近年来,许多科研院所广泛开展了对紫黑米性状的改良研究[11-14]。福建省农业科学院水稻研究所以特色稻米为突破口,经过反复实践,最终利用双黑双糯(不育系和父本同为紫黑糯品种)的亲本成功培育出了产量高、米质优、口感好的紫黑米品种紫两优737[15-16],并对其配套栽培和制种技术进行了广泛研究[17-20]。现已通过云南、安徽、福建等省份的品种审定(滇审稻2019004、晥审稻20212002、闽审稻20200067)和广西引种备案。紫黑米中的花青素和黄酮含量与其抗氧化性密切相关[4],而花青素和黄酮的形成受温度、光照等条件影响较大。张圣美等[21]研究表明高温胁迫降低了茄子的花青素和黄酮含量;唐容等[22]研究表明低温处理可以提高紫红叶油菜的花青素含量;郑顺林等[23]对紫色马铃薯的研究表明花青素含量随海拔升高而升高。沈学善等[24]通过光照试验表明马铃薯的花青素含量强光区高于弱光区。【本研究切入点】目前,紫黑米中的花青素含量变化规律是否与其他作物相同还鲜有报道。福建纵跨两个生态区,山地众多,各地种植习惯不同、季节不同、海拔不同,对紫两优737种皮花青素、黄酮、维生素含量的影响相关研究报道甚少。【拟解决的关键问题】为了探索紫黑米品种紫两优737在不同种植季节及不同海拔的营养物质变化,本研究收集了2021年福建省12个地方种植的12份样本,对其黄酮类化合物、类胡萝卜素及B族维生素含量进行了分析,以期确定紫两优737在福建省内的最佳种植季节及种植地点。
1. 材料与方法
1.1 试验材料
12份紫两优737样本分别产自漳州龙山镇宝斗村(简称漳州宝斗)、莆田钟山镇南兴村(莆田南兴)、三明水茜乡杨城村(三明杨城)、南平永兴镇后洋村(南平后洋)、宁德店下镇岚亭村(宁德岚亭)、宁德屏城乡南湾村(宁德南湾)、南平五夫镇五夫村(南平五夫)、南平岚谷乡横墩村(南平横墩)、南平吴屯乡吴边村(南平吴边)、南平吴屯乡倪坜村(南平倪坜)、泉州雷峰镇瑞坂村(泉州瑞坂)、龙岩武东镇黄埔村(龙岩黄埔),根据当地种植习惯按早季、中季、烟后季、晚季种植(以下简称早、中、烟后、晚)。种植田块肥力中等,成熟后各地取样时选有代表性的田块3块,各取稻株穗尾饱满谷样500 g,自然晾晒后混匀取500 g作为该地样本。样本去壳后选择100 g种皮完整、饱满米样送检。各地种植季节及种植地海拔见表1。
表 1 各样本信息Table 1. Information on specimens产地
Origin播种期
Seeding time/(月-日)抽穗期
Period of heading/(月-日)成熟期
Mature period/(月-日)所属种植类型
Planting type海拔
Elevation/m漳州宝斗 Baodou, Zhangzhou 04-22 08-03 09-06 早 Early season 121 莆田南兴 Nanxing, Putian 05-01 08-20 09-30 中 Middle season 590 三明杨城 Yangcheng, Sanming 06-15 09-06 10-19 烟后 Post-tobacco season 380 南平后洋 Houyang, Nanping 05-18 08-19 09-26 中 Middle season 419 宁德岚亭 Lanting, Ningde 06-20 09-17 10-28 晚 Late season 20 宁德南湾 Nanwan, Ningde 05-08 08-25 10-06 中 Middle season 950 南平五夫 Wufu, Nanping 05-25 08-16 09-30 中 Middle season 230 南平横墩 Hengdun, Nanping 05-26 08-23 10-15 中 Middle season 380 南平吴边 Wubian, Nanping 05-18 08-26 10-05 中 Middle season 579 南平倪坜 Nili, Nanping 04-25 08-09 09-20 中 Middle season 938 泉州瑞坂 Ruiban, Quanzhou 05-25 08-28 10-08 中 Middle season 285 龙岩黄埔 Huangpu, Longyan 06-15 09-10 10-13 晚 Late season 242 1.2 试验方法
类胡萝卜素、黄酮 、花青素、 维生素含量均由上海三黍生物科技有限公司测试完成。
黄酮是以芦丁为标准溶液,花青素是以矢车菊素-3-氧-槐糖苷为标准溶液,用赛默飞(美国)多功能酶标仪(Multiskan GO)测定。
维生素含量均用超高效液相色谱(Vanquish,UPLC,Thermo,USA)和高分辨质谱(Q Exactive,Thermo,USA)测定,其中盐酸硫胺素(VB1)、核黄素(VB2)、烟酰胺(VB3)、吡哆醇(VB6)质谱扫描模式为单离子检测(SIM)模式,扫描方式为正离子。腺嘌呤(VB4)、泛酸(VB5)、维生素 H(VB7)、腺嘌呤核苷酸(VB8)含量测定质谱扫描模式为单离子检测(SIM)模式;扫描方式为负离子。
1.3 数据分析
采用SPSS24、Excel统计软件对数据进行统计及主成分分析,采用Duncan's 多重比较进行方差分析。
2. 结果与分析
2.1 紫两优737维生素和花青素、黄酮、类胡萝卜素含量随种植季节的变化
按照播种时间分类,可将样品归纳为4类:早季、中季、烟后季和晚季样品,其维生素含量和黄酮类化合物、类胡萝卜素等含量差异如表2、3所示。
表 2 紫两优737维生素含量随种植季节的变化分析Table 2. Vitamin contents of grains from rice planted in different seasons种植季节
Planting season盐酸硫胺素
VB1/
(ng∙g−1)核黄素
VB2/
(ng∙g−1)烟酰胺
VB3/
(ng∙g−1)腺嘌呤
VB4/
(ng∙g−1)泛酸
VB5/
(μg∙g−1)吡哆醇
VB6/
(ng∙g−1)维生素 H
VB7/
(ng∙g−1)腺嘌呤核苷酸
VB8/
(ng∙g−1)总维生素
∑VBi/
(μg∙g−1)早
Early season485.81±3.10 b 350.20±4.31 a 592.81±7.72 a 319.91±7.32 b 9.47±0.01 a 394.41±3.12 a 2.31±1.04 a 0.92±0.20 c 11.62±0.12 a 中
Middle season444.51±4.00 c 335.91±1.73 b 255.33±1.95 bc 303.01±3.21 c 7.93±0.02 c 355.92±1.63 c 1.43±0.23 a 10.72±1.22 b 9.64±0.01 d 烟后
Post-tobacco season564.4±17.91 a 313.45±9.46 c 262.57±4.57 b 269.33±5.51 d 8.99±0.15 b 371.23±8.24 b 1.55±0.63 a 13.43±2.38 a 10.79±0.19 c 晚
Late season557.52±7.23 a 350.16±4.65 a 250.74±4.43 c 634.12±12.82 a 8.97±0.03 b 399.52±8.25 a 1.72±0.24 a 2.69±0.86 c 11.17±0.03 b 最大值
Max.598.41 392.42 598.53 688.43 9.85 478.93 3.52 31.05 12.01 最小值
Min.353.52 300.73 218.71 190.35 6.24 237.23 0.92 0.63 7.64 平均数
Average476.81 337.61 283.31 356.81 8.32 367.75 1.62 8.82 10.16 变异系数
CV/%15.01 8.12 34.11 45.44 12.12 18.02 31.74 93.17 11.92 同列数据后不同小写字母表示差异显著(P<0.05),下同。
Different lowercase letters behind same column data indicate significant differences (P<0.05). The same as below.维生素B是身体内新陈代谢必需元素,是人体内糖类、脂肪、蛋白质等代谢时不可缺少的物质。从表2看出,烟后季和晚季种植样本维生素B1含量较高,二者之间无显著性差异,但显著高于早季和中季样本,总体呈现早中季节低、晚季和烟后季高的规律,平均值为476.81 ng∙g−1,变异系数为15.01%,样本间差异较大。维生素B2早季样本和晚季样本含量相当,显著高于中季和烟后季样品,变异系数为8.12%,总体变异较小。维生素B3早季种植含量最高,达592.81 ng∙g−1,与其他季节相比高1倍多,差异显著;其他3个种植季节之间相差不大,说明维生素B3的变化可能受植株生长过程中的前期影响较大;变异系数较大,为34.11%,样本间差异较明显。维生素B4含量晚季样本含量最高,达634.12 ng∙g−1,最小的为烟后季样本,为269.33 ng∙g−1,两者相差一倍多,各种植季节之间均达显著水平差异。维生素B5在所有测验维生素中含量最高,早季样本含量最大,达9.47 μg∙g−1,最小的中季样本为7.93 μg∙g−1,晚季和烟后季样本含量相当。维生素B6含量晚季和早季样本含量最高,其次是烟后季样本,最小的是中季样本,晚季和早季的样本显著高于烟后季和中季。维生素B7含量较小,最高的是早季样本,其次是晚季、烟后季和中季样本,但四者之间差异不显著。维生素B8含量也相对较小,最大的晚季样本含量为13.43 ng∙g−1,最小的早季样本为0.92 ng∙g−1,样本变异系数表现出巨大的波动,说明种植地点和种植季节都对其含量有较大影响。紫黑米中的总维生素含量为早季种植最高,为11.62 μg∙g−1,其次是晚季(11.17 μg∙g−1),烟后季和中季含量较低,4个种植季节之间均达显著差异。总维生素含量平均为10.16 μg∙g−1,变异系数为11.92%。总体上维生素含量VB5最高,其他依次为VB1、VB6、VB4、VB2和VB3,VB8和VB7含量最低,平均不到10 ng∙g−1。各维生素含量随种植季节表现出不同的差异,说明维生素对于水稻营养生长和生殖生长过程中的温度、光照和湿度的需求不同。总含量上早、晚季种植比中季和烟后季种植维生素含量高。
有研究表明,紫黑米中含有的花青素、黄酮、甾醇等活性物质具有消炎抗疲劳、改善肠道功能、增加冠状动脉血流量、提高机体免疫力和延缓衰老等作用[25-26]。类胡萝卜素是体内维生素A的主要来源,同样也具有抗氧化、免疫调节、抗癌等功效。从表3可以看出,花青素含量以烟后季为最高(2.15 mg∙g−1),晚季次之,早季最小,为0.45 mg∙g−1,最大值和最小值之间相差近5倍。花青素含量在各个种植季节之间差异达显著水平。黄酮含量与花青素含量结果类似,烟后季种植最高,为4.79 mg∙g−1,早季种植最低,为3.94 mg∙g−1,4个种植季节之间差异均达显著水平,变异系数为15.86%。类胡萝卜素含量以晚季种植最高,为83.14 μg∙g−1,其次是烟后季,早季最低,为38.41 μg∙g−1,烟后季和晚季样本都比早季样本高一倍多,4个种植季节之间差异也均达显著水平。总体来看,对于花青素、黄酮和类胡萝卜素含量来说,晚季和烟后季种植明显比早季和中季高,其区别在于灌浆期的时期不同而导致的温度差异,说明这3种物质含量的高低与籽粒形成时的温度高低有关。
表 3 不同种植季节紫两优737花青素、黄酮、类胡萝卜素含量变化分析Table 3. Anthocyanins, flavonoids, and carotenoid in grains from rice planted in different seasons种植季节
Planting season花青素
Anthocyanin/
(mg∙g−1)黄酮
Flavonoids/
(mg∙g−1)类胡萝卜素
Carotenoid/
(μg∙g−1)早
Early season0.45±0.00 d 3.94±0.02 d 38.41±0.20 d 中
Middle season1.35±0.01 c 4.39±0.02 c 69.32±0.30 c 烟后
Post-tobacco season2.15±0.01 a 4.88±0.05 a 80.21±0.31 b 晚
Late season2.10±0.02 b 4.79±0.06 b 83.14±0.30 a 最大值
Max.2.19 5.67 96.60 最小值
Min.0.45 3.36 38.31 平均数
Average1.47 4.46 70.01 变异系数
CV/%38.08 15.86 25.45 2.2 紫两优737维生素和黄酮类物质随海拔的变化
分析发现,南平地区存在5种海拔梯度,且种植季节都相同,维生素和黄酮类物质随海拔变化的影响如表4、5所示。
表 4 维生素含量随海拔变化的分析Table 4. Vitamin contents in grains in relation to altitude of rice growing area地点
Locations海拔
Elevation/
m盐酸硫胺素
VB1/
(ng∙g−1)核黄素
VB2/
(ng∙g−1)烟酰胺
VB3/
(ng∙g−1)腺嘌呤
VB4/
(ng∙g−1)泛酸
VB5/
(μg∙g−1)吡哆醇
VB6/
(ng∙g−1)维生素 H
VB7/
(ng∙g−1)腺嘌呤核苷酸
VB8/
(ng∙g−1)总维生素
∑VBi/
(μg∙g−1)南平五夫
Wufu, Nanping230 548.51±15.53 a 309.43±6.94 b 266.03±7.83 b 247.52±6.35 b 8.73±0.06 b 344.52±5.54 c 1.82±0.24 a 3.34±1.12 b 10.45±0.049 b 南平横墩
Hengdun, Nanping380 493.21±6.33 b 320.15±2.05 b 243.42±4.93 c 227.54±6.12 c 7.13±0.03 e 279.14±1.85 e 1.22±0.13 a 2.42±0.44 b 8.70±0.046 e 南平后洋
Houyang, Nanping419 433.24±4.36 c 349.17±5.42 a 281.22±11.98 a 239.12±6.94 bc 7.68±0.07 d 293.26±2.17 d 1.75±0.87 a 24.05±7.46 a 9.32±0.07 d 南平吴边
Wubian, Nanping579 498.15±4.56 b 318.74±1.23 b 266.39±3.67 b 521.12±6.74 a 9.38±0.05 a 477.14±2.66 a 1.56±0.35 a 1.14±0.46 b 11.46±0.059 a 南平倪坜
Nili, Nanping938 411.54±4.33 d 351.92±9.04 a 222.63±3.67 d 236.35±11.33 bc 8.38±0.07 c 393.54±8.67 b 1.64±0.34 a 19.45±1.16 a 10.02±0.07 c 最大值
Max.566.3 361.63 294.23 528.53 9.44 478.96 2.62 31.08 11.52 最小值
Min.409.02 302.42 218.76 220.56 7.11 277.04 1.21 0.66 8.67 平均数
Average476.93 329.91 255.93 294.32 8.26 357.54 1.6 10.01 9.99 变异系数
CV/%10.74 5.62 8.64 39.99 9.87 20.93 26.04 104.18 9.86 表 5 同一地区不同海拔花青素、黄酮及类胡萝卜素含量Table 5. Anthocyanin, flavonoids and carotenoid in grains of rice grown at different elevations in same area地点
Locations海拔
Elevation/
m花青素
Anthocyanin/
(mg∙g−1)黄酮
Flavonoids/
(mg∙g−1)类胡萝卜素
Carotenoid/
(μg∙g−1)南平五夫
Wufu, Nanping230 0.97±0.01 c 3.82±0.05 d 67.91±0.51 c 南平横墩
Hengdun, Nanping380 0.97±0.01 c 3.40±0.06 e 51.12±0.42 d 南平后洋
Houyang, Nanping419 0.99±0.02 c 4.05±0.04 c 44.33±0.23 e 南平吴边
Wubian, Nanping579 1.77±0.03 a 4.50±0.05 b 95.54±0.92 a 南平倪坜
Nili, Nanping938 1.50±0.01 b 5.38±0.05 a 77.16±0.41 b 最大值
Max.1.79 5.43 96.61 最小值
Min.0.96 3.36 44.22 平均数
Average1.24 4.23 67.21 变异系数
CV/%27.83 16.56 28.28 从表4可以看出,紫两优737在最低海拔五夫地区的VB1含量最高,为548.51 ng∙g−1,海拔最高的倪坜地区VB1含量最低,为411.54 ng∙g−1,除吴边的样本外,VB1含量有随海拔升高呈现逐渐降低的趋势。VB2含量为倪坜地区最高,达351.92 ng∙g−1,五夫地区最低,为309.43 ng∙g−1,与VB1规律正好相反,VB2含量除吴边样本外,有随海拔升高而逐渐升高的趋势,样本变异系数为5.62%。维生素B3含量为南平后洋的样本最高(281.22 ng∙g−1),含量最低的为南平倪坜地区样本(222.63 ng∙g−1),除吴边和五夫的含量差异不显著外,其他各地之间差异均达显著水平。维生素B4含量最高的为吴边的样本(521.12 ng∙g−1),最低为倪坜样本(227.54 ng∙g−1),两者之间相差一倍多。维生素B5为所有维生素中含量最高,比其他维生素高了几十倍;不同海拔地区,吴边样本含量最高(9.38 μg∙g−1),其次为五夫、倪坜、后洋,横墩样本含量最低,为7.13 μg∙g−1,5个地点之间差异均达显著水平。维生素B6含量最大值为吴边样本(477.14 ng∙g−1),最小为横墩样本,这与维生素B5相似,各地之间差异均达显著水平。样本最大值为478.96 ng∙g−1,最小值为277.04 ng∙g−1 ,平均为357.54 ng∙g−1 ,变异系数为20.93%。VB7含量较低,不同海拔地区间差异均不显著。VB8与VB7类似,含量较低,最大为后洋样本,最小为横墩样本。维生素总含量最大为吴边样本(11.46 μg∙g−1),最小为横墩样本(8.70 μg∙g−1)。吴边样本的VB4、VB5、VB6和总含量都最高,甚至高于高海拔地区,在VB1 和VB2含量方面也显示出不同之处。各地点维生素含量的差异说明VB1可能与海拔成正相关关系,VB2则相反。其他维生素及总含量可能与种植季节以及局部地区光照、湿度等特殊小气候有关,而与海拔高低无明显相关。
从表5可以看出,吴边的样本花青素含量最大,为1.77 mg∙g−1,最低的是低海拔地区五夫和横墩,吴边和倪坜样本之间差异显著,3个相对低海拔地区之间差异不显著。黄酮含量最低为横墩样本(3.4 mg∙g−1),最大的为倪坜样本(5.38 mg∙g−1),各地区之间差异均达显著水平。吴边样本类胡萝卜素含量最高,为95.54 μg∙g−1,后洋样本类胡萝卜素含量最低,为44.33 μg∙g−1,两者相差1倍多,各处理之间差异也达显著水平。总体来说随着海拔升高,花青素和黄酮都有升高的趋势,类胡萝卜分析显示,其含量有随海拔升高先降低再升高的趋势。
2.3 紫两优737营养物质相关性分析及Bartlett球行度检验
相关性矩阵(表6)显示,虽然各营养物质之间相关性都达不到显著性相关的水平,但是观察发现B族维生素之间、B族维生素和黄酮之间、花青素和黄酮之间都存在共线性,如类胡萝卜素和花青素、黄酮、VB6等之间存在线性关系,VB5和VB6之间也存在线性关系。结合Bartlett球行度检验表明卡方值χ2为105.7,自由度n为55,显著性值P=0.00<0.05,可以进行主成分分析。
表 6 相关系数矩阵Table 6. Correlation coefficient matrix组分
Component盐酸硫胺素
VB1烟酰胺
VB3吡哆醇
VB6核黄素
VB2腺嘌呤
VB4腺嘌呤
核苷酸
VB8泛酸
VB5维生素 H
VB7花青素
Anthocyanin黄酮
Flavonoids类胡萝卜素
Carotenoid盐酸硫胺素 VB1 1.00 烟酰胺 VB3 0.04 1.00 吡哆醇 VB6 0.11 0.17 1.00 核黄素 VB2 −0.42 0.21 0.28 1.00 腺嘌呤 VB4 0.42 −0.03 0.58 0.30 1.00 腺嘌呤核苷酸 VB8 −0.48 −0.28 −0.30 0.21 −0.36 1.00 泛酸 VB5 0.43 0.41 0.74 0.25 0.39 −0.45 1.00 维生素 H VB7 0.46 0.73 0.28 0.16 0.25 −0.23 0.62 1.00 花青素 Anthocyanin 0.20 −0.54 0.52 0.04 0.51 −0.05 0.29 −0.33 1.00 黄酮 Flavonoids −0.28 −0.20 0.61 0.55 0.21 0.16 0.47 −0.13 0.69 1.00 类胡萝卜素 Carotenoid 0.10 −0.53 0.66 0.05 0.47 −0.20 0.40 −0.32 0.87 0.71 1.00 2.4 紫两优737营养物质主成分分析
对紫两优737的营养物质进行主成分分析,提取了3个主成分,可以看出(表7)VB6、VB4、VB5、花青素、黄酮和类胡萝卜素在第一主成分上有较高的载荷,这一部分体现了紫黑米中主要的营养物质。VB3、VB8、VB7在第二主成分上有较高载荷,VB1和VB2则在第三主成分上有较高载荷。
表 7 主成分因子荷载矩阵表Table 7. Load matrix of principal component factor指标
Index载荷 Load 主成分1
PC1主成分2
PC2主成分3
PC3盐酸硫胺素 VB1 0.282 0.512 −0.694 烟酰胺 VB3 −0.104 0.837 0.407 吡哆醇 VB6 0.872 0.167 0.175 核黄素 VB2 0.306 −0.012 0.819 腺嘌呤 VB4 0.704 0.188 −0.158 腺嘌呤核苷酸 VB8 −0.337 −0.511 0.455 泛酸 VB5 0.743 0.537 0.124 维生素 H VB7 0.148 0.893 0.189 花青素 Anthocyanin 0.788 −0.479 −0.237 黄酮 Flavonoids 0.735 −0.393 0.459 类胡萝卜素 Carotenoid 0.845 −0.438 −0.202 由表8可以看出第一主成分贡献率为36.38%,第二主成分贡献率为26.81%,第三主成分贡献率为17.63%,3个主成分累计贡献率为80.82%,说明这3个主成分可以解释大部分的变量,PCA分析对样品的信息能反映整体趋势。
表 8 总方差分解Table 8. Partitioning of total variance成分
Index总计
Total提取载荷平方和
Extract the quadratic sum of the loads方差百分比
Variance proportion/%累积贡献率
Accumulative contribution rate/%1 4.002 36.38 36.38 2 2.949 26.81 63.19 3 1.939 17.63 80.82 为了探索不同地区的样本整体信息,利用提取的主成分对样品进行综合评价,将数据归一化处理后,利用各主成分方差与各指标在不同主成分因子中的得分计算各指标的系数,然后结合归一化数值计算各取样地点在不同主成分上的得分,最后利用各主成分所占百分比计算总的分数,结果见表9(按总得分排序)。
表 9 各地点样本主成分得分Table 9. Scores on principal components for rice from different localities地点
Location主成分1
PC1主成分2
PC2主成分3
PC3总得分
Total种植季节
Planting season海拔
Elevation/m泉州瑞坂 Ruiban, Quanzhou −3.141 −1.717 −0.989 −2.199 中 Middle season 285 南平横墩 Hengdun, Nanping −2.559 −0.141 −1.353 −1.493 中 Middle season 380 南平后洋 Houyang, Nanping −2.392 −0.277 1.229 −0.900 中 Middle season 419 南平五夫 Wufu, Nanping −0.784 1.278 −1.320 −0.216 中 Middle-season 230 莆田南兴 Nanxing, Putian −0.028 −1.062 1.715 0.008 中 Middle season 590 三明杨城 Yangcheng, Sanming 0.933 −0.461 −0.974 0.054 烟后 Post-tobacco season 380 南平倪坜 Nili, Nanping 0.364 −1.308 1.503 0.057 中 Middle season 938 宁德南湾 Nanwan, Ningde 1.538 −2.013 1.164 0.278 中 Middle season 950 龙岩黄埔 Huangpu, Longyan 1.732 0.635 −1.989 0.556 晚 Late season 242 南平吴边 Wubian, Nanping 2.332 0.235 −1.027 0.903 中 Middle season 579 漳州宝斗 Baodou, Zhangzhou −0.924 4.480 1.598 1.420 早 Early season 121 宁德岚亭 Lanting, Ningde 2.930 0.351 0.444 1.532 晚 Late season 20 从表中可以看出,宁德岚亭的样本得分最高,为1.532;最低为泉州瑞坂地区样本数值,为−2.199。从种植季节来看,中季除南平吴边样本外,普遍得分较低,晚季样本得分整体最高,其次是早季。从海拔高度来看,海拔与得分无明显相关关系,但是随海拔的升高,中季品种得分有上升的趋势。这与前面分析的总类黄酮类物质随着海拔的升高逐渐升高的变化趋势相对应。总的来看,中季种植不利于紫黑米活性物质和维生素的积累,晚季种植情况下,抽穗正值9月下旬,昼夜温差大,有利于营养物质的积累,对稻米营养品质起了很大的促进作用。
3. 讨论与结论
3.1 种植季节及海拔对B族维生素含量的影响
B族维生素是维持人体正常生长发育不可或缺的营养物质。对人体内蛋白质、脂肪、糖类等代谢发挥重要作用。B族维生素对一些疾病的治疗与控制具有积极作用,维生素B5具有制造抗体的功能,在对抗压力、维护头发、皮肤及血液健康方面扮演着重要角色。单美荣等[27]研究表明维生素 B6可抑制LPS诱导的急性肺部炎症。沙静等[28]研究认为维生素B1口服联合甲钴胺注射对糖尿病周围神经病变治疗效果显著。本研究对12个紫黑米样本的维生素含量按不同种植季节进行了对比,结果显示,紫黑米中的总维生素含量在早季种植最高,其次是晚季,烟后季和中季排三、四位;维生素绝对值含量方面VB5含量最高,平均为8.32 μg·g−1,其他依次为VB1>VB6>VB4>VB2>VB3>VB8>VB7。邹德堂等[29]对14份粳稻黑米的维生素含量进行了分析,表明不同来源的黑米维生素含量中,黑色种皮稻米中VB1、 VB5、VB6和VB7含量最高,前三名跟本文结论一致,说明紫黑米中主要维生素含量为VB1、 VB5、VB6,三者含量大小受品种、种植地点、气候温度等环境的影响。维生素含量随海拔变化的结果表明,其含量高低与海拔无明显相关关系。
3.2 种植季节及海拔对花青素、黄酮和类胡萝卜素等的影响
黄酮是一种很强的抗氧剂,可有效清除体内的氧自由基,类黄酮类化合物花青素阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上,这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老,也可阻止癌症的发生[30]。米质分析表明花青素、黄酮和类胡萝卜素含量晚季和烟后季种植明显比早季和中季高。晚季和烟后季7同属一个生态环境,种植季节的不同本质上反映的是抽穗后期极端高温和日平均温的变化,福建(福州为例)早季和中季抽穗灌浆期一般是在6月10日至7月20日和8月1日至9月15日,而烟后季一般是在8月20日至9月25日,晚季一般是9月10日至10月20日,气温是先低到高再降低的趋势。已有的研究表明,温度在花色素苷积累过程中扮演着重要的角色[31]。在一定范围内,低温能保持花色素苷相对稳定,而高温可能促使花色素苷分解[32-35],这个与本文结果相对应,说明紫黑米中的花青素含量与其他作物有相同的变化规律。海拔对于花青素、黄酮、类胡萝卜素的影响表明,随着海拔升高,花青素、黄酮、类胡萝卜素都有升高的趋势,海拔的差异体现的是光照、温度及湿度的差异。通常意义上,海拔每上升100 m,温度降低0.6 ℃。本研究中吴边的海拔579 m,倪坜的海拔938 m,但是吴边样本的花青素和类胡萝卜素都比倪坜的高,说明海拔不是影响这些营养成分的主要原因,花青素含量的变化可能还受辐射、水分和土壤pH值[36]等因素的影响,具体原因还有待进一步分析。该地是否是种植紫两优737的最佳地点也有待于进一步探讨。光照是诱导花色素苷合成的重要因素[37]。研究表明一定范围内,光照越强,花色素苷积累越多;且蓝光、紫外光是促进花色素苷合成的最有效光质[38-39]。关于光照对紫两优737花青素含量的影响有待进一步研究。
种植时间是影响紫两优737营养物质积累的主要因素,由种植季节带来的差异影响大于因海拔变化而带来的差异影响。对于同一地区的中季品种而言,高海拔种植能明显提高紫黑米的营养物质含量。对不同地区的晚季品种而言,要选择晚季温度较低的闽北地区种植。对于晚季品种而言,同一地区不同海拔的样本含有的花青素、黄酮和类胡萝卜素差异是否与中季种植变化一致有待于下一步研究。
综上,福建山区众多,受当地的光温限制,紫两优737在北部地区种植一季中稻情况下宜在高海拔地区种植,晚季因面临能否安全齐穗的问题,适宜于低海拔种植。福建南部地区可以兼顾早晚稻,早季种植可获得较高的维生素,晚季种植可获得较高的花青素和黄酮。另外,紫黑米不仅含有本研究所测定的B族维生素、花青素、黄酮等物质,还含有鳖稀、维生素E、r-谷维素、GABA、生育三稀甘油酯衍生物、植酸、植物甾醇类、异牡荆黄素和二十八醇等100多种活性物质,具有抗癌、消炎、抗糖尿病、降血脂、抗疲劳和防治心血管疾病等功效[40]。因此,紫两优737品种的选育与推广将稻米由单一饱腹转变为集饱腹、美味、营养与保健等为一体的复合功能稻米,紫黑米在发挥复合功能和成为新型功能食品上具有天然的优势。
-
表 1 各样本信息
Table 1 Information on specimens
产地
Origin播种期
Seeding time/(月-日)抽穗期
Period of heading/(月-日)成熟期
Mature period/(月-日)所属种植类型
Planting type海拔
Elevation/m漳州宝斗 Baodou, Zhangzhou 04-22 08-03 09-06 早 Early season 121 莆田南兴 Nanxing, Putian 05-01 08-20 09-30 中 Middle season 590 三明杨城 Yangcheng, Sanming 06-15 09-06 10-19 烟后 Post-tobacco season 380 南平后洋 Houyang, Nanping 05-18 08-19 09-26 中 Middle season 419 宁德岚亭 Lanting, Ningde 06-20 09-17 10-28 晚 Late season 20 宁德南湾 Nanwan, Ningde 05-08 08-25 10-06 中 Middle season 950 南平五夫 Wufu, Nanping 05-25 08-16 09-30 中 Middle season 230 南平横墩 Hengdun, Nanping 05-26 08-23 10-15 中 Middle season 380 南平吴边 Wubian, Nanping 05-18 08-26 10-05 中 Middle season 579 南平倪坜 Nili, Nanping 04-25 08-09 09-20 中 Middle season 938 泉州瑞坂 Ruiban, Quanzhou 05-25 08-28 10-08 中 Middle season 285 龙岩黄埔 Huangpu, Longyan 06-15 09-10 10-13 晚 Late season 242 表 2 紫两优737维生素含量随种植季节的变化分析
Table 2 Vitamin contents of grains from rice planted in different seasons
种植季节
Planting season盐酸硫胺素
VB1/
(ng∙g−1)核黄素
VB2/
(ng∙g−1)烟酰胺
VB3/
(ng∙g−1)腺嘌呤
VB4/
(ng∙g−1)泛酸
VB5/
(μg∙g−1)吡哆醇
VB6/
(ng∙g−1)维生素 H
VB7/
(ng∙g−1)腺嘌呤核苷酸
VB8/
(ng∙g−1)总维生素
∑VBi/
(μg∙g−1)早
Early season485.81±3.10 b 350.20±4.31 a 592.81±7.72 a 319.91±7.32 b 9.47±0.01 a 394.41±3.12 a 2.31±1.04 a 0.92±0.20 c 11.62±0.12 a 中
Middle season444.51±4.00 c 335.91±1.73 b 255.33±1.95 bc 303.01±3.21 c 7.93±0.02 c 355.92±1.63 c 1.43±0.23 a 10.72±1.22 b 9.64±0.01 d 烟后
Post-tobacco season564.4±17.91 a 313.45±9.46 c 262.57±4.57 b 269.33±5.51 d 8.99±0.15 b 371.23±8.24 b 1.55±0.63 a 13.43±2.38 a 10.79±0.19 c 晚
Late season557.52±7.23 a 350.16±4.65 a 250.74±4.43 c 634.12±12.82 a 8.97±0.03 b 399.52±8.25 a 1.72±0.24 a 2.69±0.86 c 11.17±0.03 b 最大值
Max.598.41 392.42 598.53 688.43 9.85 478.93 3.52 31.05 12.01 最小值
Min.353.52 300.73 218.71 190.35 6.24 237.23 0.92 0.63 7.64 平均数
Average476.81 337.61 283.31 356.81 8.32 367.75 1.62 8.82 10.16 变异系数
CV/%15.01 8.12 34.11 45.44 12.12 18.02 31.74 93.17 11.92 同列数据后不同小写字母表示差异显著(P<0.05),下同。
Different lowercase letters behind same column data indicate significant differences (P<0.05). The same as below.表 3 不同种植季节紫两优737花青素、黄酮、类胡萝卜素含量变化分析
Table 3 Anthocyanins, flavonoids, and carotenoid in grains from rice planted in different seasons
种植季节
Planting season花青素
Anthocyanin/
(mg∙g−1)黄酮
Flavonoids/
(mg∙g−1)类胡萝卜素
Carotenoid/
(μg∙g−1)早
Early season0.45±0.00 d 3.94±0.02 d 38.41±0.20 d 中
Middle season1.35±0.01 c 4.39±0.02 c 69.32±0.30 c 烟后
Post-tobacco season2.15±0.01 a 4.88±0.05 a 80.21±0.31 b 晚
Late season2.10±0.02 b 4.79±0.06 b 83.14±0.30 a 最大值
Max.2.19 5.67 96.60 最小值
Min.0.45 3.36 38.31 平均数
Average1.47 4.46 70.01 变异系数
CV/%38.08 15.86 25.45 表 4 维生素含量随海拔变化的分析
Table 4 Vitamin contents in grains in relation to altitude of rice growing area
地点
Locations海拔
Elevation/
m盐酸硫胺素
VB1/
(ng∙g−1)核黄素
VB2/
(ng∙g−1)烟酰胺
VB3/
(ng∙g−1)腺嘌呤
VB4/
(ng∙g−1)泛酸
VB5/
(μg∙g−1)吡哆醇
VB6/
(ng∙g−1)维生素 H
VB7/
(ng∙g−1)腺嘌呤核苷酸
VB8/
(ng∙g−1)总维生素
∑VBi/
(μg∙g−1)南平五夫
Wufu, Nanping230 548.51±15.53 a 309.43±6.94 b 266.03±7.83 b 247.52±6.35 b 8.73±0.06 b 344.52±5.54 c 1.82±0.24 a 3.34±1.12 b 10.45±0.049 b 南平横墩
Hengdun, Nanping380 493.21±6.33 b 320.15±2.05 b 243.42±4.93 c 227.54±6.12 c 7.13±0.03 e 279.14±1.85 e 1.22±0.13 a 2.42±0.44 b 8.70±0.046 e 南平后洋
Houyang, Nanping419 433.24±4.36 c 349.17±5.42 a 281.22±11.98 a 239.12±6.94 bc 7.68±0.07 d 293.26±2.17 d 1.75±0.87 a 24.05±7.46 a 9.32±0.07 d 南平吴边
Wubian, Nanping579 498.15±4.56 b 318.74±1.23 b 266.39±3.67 b 521.12±6.74 a 9.38±0.05 a 477.14±2.66 a 1.56±0.35 a 1.14±0.46 b 11.46±0.059 a 南平倪坜
Nili, Nanping938 411.54±4.33 d 351.92±9.04 a 222.63±3.67 d 236.35±11.33 bc 8.38±0.07 c 393.54±8.67 b 1.64±0.34 a 19.45±1.16 a 10.02±0.07 c 最大值
Max.566.3 361.63 294.23 528.53 9.44 478.96 2.62 31.08 11.52 最小值
Min.409.02 302.42 218.76 220.56 7.11 277.04 1.21 0.66 8.67 平均数
Average476.93 329.91 255.93 294.32 8.26 357.54 1.6 10.01 9.99 变异系数
CV/%10.74 5.62 8.64 39.99 9.87 20.93 26.04 104.18 9.86 表 5 同一地区不同海拔花青素、黄酮及类胡萝卜素含量
Table 5 Anthocyanin, flavonoids and carotenoid in grains of rice grown at different elevations in same area
地点
Locations海拔
Elevation/
m花青素
Anthocyanin/
(mg∙g−1)黄酮
Flavonoids/
(mg∙g−1)类胡萝卜素
Carotenoid/
(μg∙g−1)南平五夫
Wufu, Nanping230 0.97±0.01 c 3.82±0.05 d 67.91±0.51 c 南平横墩
Hengdun, Nanping380 0.97±0.01 c 3.40±0.06 e 51.12±0.42 d 南平后洋
Houyang, Nanping419 0.99±0.02 c 4.05±0.04 c 44.33±0.23 e 南平吴边
Wubian, Nanping579 1.77±0.03 a 4.50±0.05 b 95.54±0.92 a 南平倪坜
Nili, Nanping938 1.50±0.01 b 5.38±0.05 a 77.16±0.41 b 最大值
Max.1.79 5.43 96.61 最小值
Min.0.96 3.36 44.22 平均数
Average1.24 4.23 67.21 变异系数
CV/%27.83 16.56 28.28 表 6 相关系数矩阵
Table 6 Correlation coefficient matrix
组分
Component盐酸硫胺素
VB1烟酰胺
VB3吡哆醇
VB6核黄素
VB2腺嘌呤
VB4腺嘌呤
核苷酸
VB8泛酸
VB5维生素 H
VB7花青素
Anthocyanin黄酮
Flavonoids类胡萝卜素
Carotenoid盐酸硫胺素 VB1 1.00 烟酰胺 VB3 0.04 1.00 吡哆醇 VB6 0.11 0.17 1.00 核黄素 VB2 −0.42 0.21 0.28 1.00 腺嘌呤 VB4 0.42 −0.03 0.58 0.30 1.00 腺嘌呤核苷酸 VB8 −0.48 −0.28 −0.30 0.21 −0.36 1.00 泛酸 VB5 0.43 0.41 0.74 0.25 0.39 −0.45 1.00 维生素 H VB7 0.46 0.73 0.28 0.16 0.25 −0.23 0.62 1.00 花青素 Anthocyanin 0.20 −0.54 0.52 0.04 0.51 −0.05 0.29 −0.33 1.00 黄酮 Flavonoids −0.28 −0.20 0.61 0.55 0.21 0.16 0.47 −0.13 0.69 1.00 类胡萝卜素 Carotenoid 0.10 −0.53 0.66 0.05 0.47 −0.20 0.40 −0.32 0.87 0.71 1.00 表 7 主成分因子荷载矩阵表
Table 7 Load matrix of principal component factor
指标
Index载荷 Load 主成分1
PC1主成分2
PC2主成分3
PC3盐酸硫胺素 VB1 0.282 0.512 −0.694 烟酰胺 VB3 −0.104 0.837 0.407 吡哆醇 VB6 0.872 0.167 0.175 核黄素 VB2 0.306 −0.012 0.819 腺嘌呤 VB4 0.704 0.188 −0.158 腺嘌呤核苷酸 VB8 −0.337 −0.511 0.455 泛酸 VB5 0.743 0.537 0.124 维生素 H VB7 0.148 0.893 0.189 花青素 Anthocyanin 0.788 −0.479 −0.237 黄酮 Flavonoids 0.735 −0.393 0.459 类胡萝卜素 Carotenoid 0.845 −0.438 −0.202 表 8 总方差分解
Table 8 Partitioning of total variance
成分
Index总计
Total提取载荷平方和
Extract the quadratic sum of the loads方差百分比
Variance proportion/%累积贡献率
Accumulative contribution rate/%1 4.002 36.38 36.38 2 2.949 26.81 63.19 3 1.939 17.63 80.82 表 9 各地点样本主成分得分
Table 9 Scores on principal components for rice from different localities
地点
Location主成分1
PC1主成分2
PC2主成分3
PC3总得分
Total种植季节
Planting season海拔
Elevation/m泉州瑞坂 Ruiban, Quanzhou −3.141 −1.717 −0.989 −2.199 中 Middle season 285 南平横墩 Hengdun, Nanping −2.559 −0.141 −1.353 −1.493 中 Middle season 380 南平后洋 Houyang, Nanping −2.392 −0.277 1.229 −0.900 中 Middle season 419 南平五夫 Wufu, Nanping −0.784 1.278 −1.320 −0.216 中 Middle-season 230 莆田南兴 Nanxing, Putian −0.028 −1.062 1.715 0.008 中 Middle season 590 三明杨城 Yangcheng, Sanming 0.933 −0.461 −0.974 0.054 烟后 Post-tobacco season 380 南平倪坜 Nili, Nanping 0.364 −1.308 1.503 0.057 中 Middle season 938 宁德南湾 Nanwan, Ningde 1.538 −2.013 1.164 0.278 中 Middle season 950 龙岩黄埔 Huangpu, Longyan 1.732 0.635 −1.989 0.556 晚 Late season 242 南平吴边 Wubian, Nanping 2.332 0.235 −1.027 0.903 中 Middle season 579 漳州宝斗 Baodou, Zhangzhou −0.924 4.480 1.598 1.420 早 Early season 121 宁德岚亭 Lanting, Ningde 2.930 0.351 0.444 1.532 晚 Late season 20 -
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