SRAP Analysis on Genetic Diversity of Brassica juncea
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摘要: 以44个芥菜品种为材料,利用SRAP分子标记对其进行遗传多样性研究。从100个不同的引物组合中筛选出了31对多态性较高,条带清晰且稳定的引物,对44个芥菜材料DNA进行PCR扩增。结果表明,这31对引物共产生了286条条带,其中多态性条带173条,多态率达60.49%。平均每对引物扩增条带9.23条。用NTSYS统计软件进行聚类分析,44个芥菜品种的遗传相似系数为0.61~0.89,平均系数为0.75。在相似系数为0.67的水平,44个芥菜品种可分为4大类,与形态学分类结果基本一致。Abstract: An SRAP marker was applied to analyze the genetic diversity of 44 accessions of Brassica juncea(L.). Thirty-one pairs of SRAP primer combinations, which amplified stable bands with clear and higher polymorphism, were selected by a preliminary screening. A total of 286 DNA bands were amplified from the 44 accessions of B. juncea by PCR amplification.Among them, 60.49% or 173 DNA bands were polymorphic.The average number of DNA bands amplified by each pair of primer combination was 9.23. The clustering analysis by NTSYS statistical software showed that the genetic similarity coefficients were in the range of 0.61-0.89 averaging 0.75. At the coefficient of 0.67, the 44 accessions were divided into 4 groups which were identical with the result obtained by the morphological classification.
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Key words:
- Brassica juncea /
- SRAP /
- genetic diversity
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图 1 部分引物初步筛选
注:M为DNA Marker,2、21、38分别为供试芥菜材料编号,见表 1;Em14/Me13、Em16/Me12、Em17/Me13、Em17/Me17、Em2/Me7为引物组合。
Figure 1. Preliminary screening on partial primers
表 1 44份芥菜材料的性状
Table 1. Properties of 44 B. juncea materials
编号 品种 品种
来源下胚轴
颜色株型 叶形 叶裂
回数叶面 结球性 叶面刺毛 芥辣味 叶柄横切
面形状食用器官、
类型1 龙岩青皮芥菜 福建龙岩市 浅紫 直立 卵圆形 多回 皱 不结球 无 浓 细窄圆 棒状茎、鲜食 2 连城紫芥菜 福建龙岩市 浅紫 开展 阔椭圆 1回 微皱 不结球 无 中 中圆 紫叶、鲜食 3 抗热四季ok甜芥菜 广西横县 浅紫 直立 阔椭圆 1回 平滑 不结球 无 淡 宽厚 叶、鲜食 4 华517 湖北武汉市 浅绿 浅绿 倒卵 1回 微皱 不结球 无 淡 宽扁 棒状茎、鲜食 5 厦门芥菜 福建龙岩市 浅绿 开展 扇形 1回 皱 不结球 无 浓 中圆 叶、鲜食 6 华515 华中农大 浅紫 开展 阔椭圆 1回 皱 不结球 无 中 中圆 叶、鲜食 7 平和芥菜 福建龙岩市 浅紫 直立 椭圆 多回 微皱 不结球 无 浓 宽扁 叶、鲜食 8 特选种竹芥菜 广东广州市 浅紫 直立 阔椭圆 1回 平滑 不结球 无 淡 宽扁 叶、鲜食 9 龙岩长茎芥菜2 北京市 浅绿 直立 卵圆形 多回 皱 不结球 无 浓 细窄圆 棒状茎、鲜食 10 细叶雪里蕻 福建龙岩市 绿 半直立 倒披针 多回 平滑 不结球 无 浓 细窄圆 叶、鲜食 11 龙岩芥菜3 福建龙岩市 浅绿 半直立 倒卵 1回 微皱 不结球 无 淡 宽扁 棒状茎、鲜食 12 客家甜芥菜 广东兴宁市 浅紫 半直立 阔椭圆 1回 平滑 不结球 无 淡 宽扁 叶、鲜食 13 四季甜客家芥 江西宜春市 浅紫 直立 阔椭圆 1回 平滑 不结球 无 淡 宽扁 叶、鲜食 14 本地大菜 广东兴宁市 浅紫 直立 倒卵 1回 皱 不结球 无 浓 宽扁 叶、鲜食 15 张白土茎用芥菜 福建龙岩市 浅紫 直立 卵圆形 多回 皱 不结球 无 浓 细窄圆 棒状茎、鲜食 16 漳州芥菜2 福建龙岩市 浅绿 直立 倒卵 1回 皱 不结球 无 中 细窄圆 叶、鲜食 17 特选大坪埔大肉包心芥菜 广西横县 紫 开展 扁圆 1回 皱 结球 无 浓 宽厚 叶球、鲜食 18 广东鸡那菜 福建龙岩市 浅绿 直立 倒披针 多回 微皱 不结球 无 浓 中圆 叶、鲜食 19 美口宽杆芥菜 甘肃省武威市 浅绿 开展 卵圆 1回 皱 不结球 无 中 宽扁 叶、鲜食 20 闽清大芥菜 福建福州市 浅紫 半直 倒卵 1回 微皱 不结球 无 浓 中圆 叶、鲜食 21 精品大肉大坪包心芥 江西宜春市 紫 开展 扁圆 1回 皱 结球 无 浓 宽厚 叶球、鲜食 22 台湾芥菜1 福建龙岩市 浅绿 半直立 长倒卵 1回 平滑 不结球 无 中 宽厚 叶、鲜食 23 宽帮青菜 四川省绵阳市 浅紫 开展 阔椭圆 1回 微皱 不结球 无 中 细窄圆 叶、腌制 24 四川大肉青 四川省广汉市 浅绿 开展 阔倒卵 1回 皱 不结球 无 中 宽厚 叶、腌制 25 华513 湖北武汉市 浅紫 开展 倒卵 1回 微皱 不结球 有 中 宽扁 叶、腌制 26 华512 湖北武汉市 浅紫 开展 阔椭圆 1回 微皱 不结球 有 浓 宽扁 叶、腌制 27 华516 湖北武汉市 浅紫 开展 阔椭圆 1回 微皱 不结球 有 中 宽扁 叶、腌制 28 上杭毛芥菜 福建龙岩市 浅绿 半直立 卵圆形 1回 微皱 不结球 有 中 细窄圆 叶球、鲜食 29 宽叶厚肉高脚芥 广东兴宁市 浅紫 直立 倒卵 1回 微皱 不结球 无 浓 宽扁 叶、鲜食 30 连城芥菜 福建龙岩市 浅绿 直立 卵圆形 多回 皱 不结球 无 浓 细窄圆 棒状茎、鲜食 31 香巷客家甜芥菜 广东兴宁市 浅紫 半直立 阔椭圆 1回 平滑 不结球 无 淡 宽厚 叶、鲜食 32 福州宽杆芥菜 福建福州市 浅紫 半直立 阔椭圆 1回 皱 不结球 无 中 宽扁 叶、鲜食 33 闽清大挂菜 福建省农业科学院 浅紫 半直立 倒卵 1回 微皱 不结球 无 中 中圆 叶、鲜食 34 特选甜脆客家芥菜 广东深圳市 浅紫 半直立 阔椭圆 1回 平滑 不结球 无 淡 宽扁 叶、鲜食 35 皱叶芥 福建龙岩市 浅紫 直立 阔椭圆 1回 皱 结球 无 中 中圆 叶球、鲜食 36 永定客家芥 福建龙岩市 浅紫 直立 卵圆形 多回 皱 不结球 无 浓 细窄圆 棒状茎、鲜食 37 万安客家芥菜 福建龙岩市 浅绿 直立 倒卵 1回 微皱 不结球 无 中 宽扁 棒状茎、鲜食 38 桂林甜芥菜薹 广西横县 紫 开展 阔椭圆 1回 平滑 结球 无 浓 宽厚 叶、花薹、鲜食 39 绿欣芥菜 福建龙岩市 浅绿 直立 倒卵 1回 皱 不结球 无 中 细窄圆 棒状茎、鲜食 40 龙芥1号 福建龙岩市 浅绿 直立 卵圆形 多回 皱 不结球 无 浓 细窄圆 棒状茎、鲜食 41 大排芥菜 福建龙岩市 浅绿 直立 阔椭圆 1回 微皱 结球 无 浓 宽扁 叶球、鲜食 42 紫脉芥 福建龙岩市 浅紫 开展 倒卵 1回 皱 不结球 无 中 宽扁 叶、鲜食 43 台湾芥菜2 龙岩市农科所 浅紫 开展 阔倒卵 1回 微皱 结球 无 浓 中圆 叶球、鲜食 44 龙岩长茎芥菜 福建龙岩市 浅紫 直立 卵圆形 多回 皱 不结球 无 浓 细窄圆 棒状茎、鲜食 表 2 SRAP引物序列信息
Table 2. Information on SRAP primer sequence
代号 上游引物 代号 下游引物 Me1 TGAGTCCAAACCGGATA Em1 GACTGCGTACGAATTAAT Me2 TGAGTCCAAACCGGAGC Em2 GACTGCGTACGAATTTGC Me3 TGAGTCCAAACCGGAAT Em3 GACTGCGTACGAATTGAC Me4 TGAGTCCAAACCGGACC Em4 GACTGCGTACGAATTTGA Me5 TGAGTCCAAACCGGAAG Em5 GACTGCGTACGAATTAAC Me6 TGAGTCCAAACCGGTAA Em6 GACTGCGTACGAATTGCA Me7 TGAGTCCAAACCGGTCC Em7 GACTGCGTACGAATTATG Me8 TGAGTCCAAACCGGTGC Em8 GACTGCGTACGAATTCTG Me9 TTCAGGGTGGCCGGATG Em9 GACTGCGTACGAATTACG Me10 TGGGGACAACCCGGCTT Em10 GACTGCGTACGAATTTAG Me11 TGGGGACAACCCGGTTC Em11 GACTGCGTACGAATTTCG Me12 TGGGGACAACCCGGTAG Em12 GACTGCGTACGAATTGTC Me13 TGGGGACAACCCGGTCA Em13 GACTGCGTACGAATTGGT Me14 TGGGGACAACCCGGTGT Em14 GACTGCGTACGAATTCAG Me15 TGGGGACAACCCGGTTG Em15 GACTGCGTACGAATTCTG Me16 TGAGTCCAAACCGGATA Em16 GACTGCGTACGAATTCGG Me17 TGAGTCCAAACCGGACA Em17 GACTGCGTACGAATTCCA Me18 TGAGTCCAAACCGGACA Em18 GACTGCGTACGAATTCAA Me19 TGAGTCCAAACCGGACG Em19 GACTGCGTACGAATTCGA Me20 TGAGTCCAAACCGGGCT Em20 GACTGCGTACGAATTCAG 表 3 SRAP引物组合及其对44份芥菜材料扩增结果
Table 3. SRAP primer combinations and amplifications for 44 B. juncea material
序号 引物组合 位点
总数多态位
点数多态比例
/%1 em20/me6 14 6 42.86 2 Em2/Me16 7 4 57.14 3 Em17/Me17 9 7 77.78 4 Em2/M17 7 4 57.14 5 Em10/Me13 11 6 54.55 6 Em17/Me13 11 5 45.45 7 Em14/Me13 10 5 50.00 8 Em15/Me1 13 7 53.85 9 Em14/Me17 7 5 71.43 10 Em16/Me12 10 7 70.00 11 Em8/Me16 13 6 46.15 12 Em1/Me9 7 5 71.43 13 Em2/Me7 8 7 87.50 14 Em2/Me8 8 7 87.50 15 Em4/Me10 10 6 60.00 16 Em5/Me14 11 8 72.73 17 Em6/me8 8 6 75.00 18 Em7/Me1 7 4 57.14 19 Em7/Me12 8 5 62.50 20 Em7/M14 7 4 57.14 21 Em10/Me12 9 4 44.44 22 Em10/Me15 11 7 63.64 23 Em12/Me10 12 6 50.00 24 Em12/Me15 9 7 77.78 25 Em14/Me6 11 7 63.64 26 Em14/Me12 9 5 55.56 27 Em15/Me2 5 3 60.00 28 Em17/Me3 8 4 50.00 29 Em17/M7 9 5 55.56 30 Em20/Me12 7 4 57.15 31 Em16/Me12 10 7 70.00 -
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