HPLC Profiling of Catechins and Purine Alkaloids in Leaves of Oolong and Green Tea Cultivars
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摘要: 为揭示适制乌龙茶和绿茶品种鲜叶的基本生化特性，对集中种植的10个乌龙茶品种和10个绿茶品种春季和秋季鲜叶（一芽二、三叶）进行儿茶素类和嘌呤碱高效液相色谱（HPLC）指纹图谱构建，并采用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）等方法进行可视化模式识别。结果表明，乌龙茶品种与绿茶品种鲜叶样存在良好的类群区分。乌龙茶品种鲜叶样的儿茶素类和嘌呤碱指纹图谱的模式分布较为离散，且存在明显的季节性差异。乌龙茶品种相较绿茶品种鲜叶样拥有更丰富的儿茶素类和嘌呤碱组分。咖啡碱（CAF）、可可碱（TB）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）、儿茶素（C）、表没食子儿茶素（EGC）和1种未知化合物为鉴别乌龙茶品种与绿茶品种鲜叶样的主要差异标志物，而7种未知化合物和表没食子儿茶素（EGC）则可视为鉴别乌龙茶品种春季鲜叶样与秋季鲜叶样的重要差异标志物。该研究结果可为适制乌龙茶和绿茶品种的选育与鉴定提供参考依据。Abstract: The contents of catechins and purine alkaloids in two or three leaves with a bud from the spring and autumn shoots of 10 oolong and 10 green tea cultivars (Camellia sinensis) were determined by high performance liquid chromatography. A visual pattern recognition was performed with the aid of the principal components analysis, orthogonal partial least squares discriminant analysis and other statistical methods. There were distinctive differences on the profiles between the two categories of cultivars. The catechin and purine alkaloid fingerprints of oolong teas appeared more abundant and diverse than those of green teas. They also differed significantly by the season the leaves were plucked. Among the chemical constituents, caffeine, theobromine, epicatechin gallate, catechin, epigallocatechin, and an unknown component were particularly prominent. They could be used as the major markers for differentiating the two teas. In addition, 7 unknown components and epigallocatechin appeared suitable for distinguishing the spring shoots from the autumn shoots of oolong teas.
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Keywords:
- catechins /
- purine alkaloids /
- pattern recognition /
- tea cultivars /
- fingerprint
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福建茶树品种资源丰富，素有“茶树良种王国”之称。茶树种质资源的科学鉴定和系统评价是优异种质资源发掘与利用的重要前提。20世纪70年代，闽茶科技工作者在广泛征集和保存国内外茶树种质资源的基础上，对其农艺性状、加工品质、生理生化和抗逆性等进行了较为系统的鉴定评价，并选育出国家审(鉴、认)定品种26个，省级审定品种19个[1]。福建属多茶类产区，其中红茶、乌龙茶和白茶均发源于此。通过长期的茶树品种茶类加工适制性鉴定，不同茶区逐步形成了与当地主栽品种相适宜的茶类加工区域格局。尽管现有茶叶品种花色种类众多，乌龙茶和绿茶仍属福建主产茶类。《福建统计年鉴》统计结果显示，2016年福建茶叶总产量为42.68万t，其中乌龙茶和绿茶分别占总产量的53.48%和30.45%。因此，加快适制乌龙茶和绿茶品种的选育与鉴定对闽茶科技工作者意义重大。
茶多酚约占茶树新梢干重的20%~35%，具有明显的苦涩味，其含量高低直接影响了茶树品种的茶类适制特性[2]。茶多酚(儿茶素类)在制茶过程中的氧化程度亦是茶类划分的重要依据之一[3]。嘌呤碱约为茶叶干重的2%~5%，主要有咖啡碱、可可碱和茶叶碱。它们在生物体内通过次黄嘌呤核苷酸转变而来，并可在嘌呤碱代谢过程中相互转化[4]。现代医学研究表明，茶多酚(儿茶素类)的抗氧化活力对多种氧化胁迫性疾病(如癌症、心血管疾病、紫外辐射)和机体老化等具有重要的防护和保健作用[5-10]；咖啡碱则具有兴奋中枢神经和强心利尿等生理活性[11]。随着现代仪器分析检测技术的快速发展，源起于中药质量评价与控制的指纹图谱技术近年被逐步应用于茶叶品种或产地来源、质量等级鉴定和工艺过程控制等诸多方面[12-14]。为揭示适制乌龙茶和绿茶品种鲜叶的基本生化特性，本研究对集中种植的乌龙茶品种和绿茶品种春季和秋季鲜叶样进行了儿茶素类和嘌呤碱高效液相色谱(HPLC)指纹图谱构建，并通过主成分分析(PCA)、正交偏最小乘判别分析(OPLS-DA)等可视化模式识别方法对供试茶样作类群归属判别及差异特征成分筛选，以期为适制乌龙茶和绿茶品种的生化鉴定提供参考依据。
1. 材料与方法
1.1 试验材料
供试鲜叶均采自集中分行种植于福建茶树资源圃4~5龄试验茶园(北纬27°13′57″，东经119°34′31″)的10个乌龙茶品种与10个绿茶品种春季(3月26日至4月23日)和秋季(9月30日至10月16日)第一轮新梢，采摘标准：茶树新梢伸长至一芽三叶初展时采摘一芽二、三叶。乌龙茶品种按产地来源可划分为：(1)闽北品种：肉桂、水仙、大红袍和矮脚乌龙；(2)闽南品种：铁观音、黄棪、梅占和白芽奇兰；(3)闽东新品种：金观音和黄观音。绿茶品种包括：(1)国家认(鉴)定绿茶品种：福鼎大白茶、福鼎大毫茶、福安大白茶、福云6号、福云7号、福云10号和霞浦春波绿；(2)福建省审定绿茶品种：九龙大白茶、霞浦元宵茶和早春毫。标准品：没食子儿茶素(GC，纯度>98%)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG，纯度>98%)和茶叶碱(TP，纯度>99%)(Adamas试剂)，没食子酸单水合物(GA，纯度>99%)、表儿茶素(EC，纯度≥98%)、表儿茶素没食子酸酯(ECG，纯度≥98%)、表没食子儿茶素(EGC，纯度≥98%)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG，纯度≥98%)、咖啡因(CAF，USP/BP)和可可碱(TB，纯度≥99%)(Aladdin试剂)，儿茶素(C，纯度≥98%)和儿茶素没食子酸酯(CG，纯度≥98%)(Sigma-Aldrich试剂)。甲酸溶液(49%~51%，HPLC级，Fluka试剂)、甲醇和乙腈(HPLC级，Sigma-Aldrich试剂)。
1.2 仪器设备
安捷伦1260 Infinity液相色谱系统，包括四元泵(G1311C VL)、标准自动进样器(G1329B)、柱温箱(G1316A)和二极管阵列检测器(G1315D VL)；化学工作站：ChemStation for LC 3D systems Rev. B.04.03)。ACD-0502-U实验室超纯水系统(重庆颐洋企业发展有限公司)，PL203电子天平(美国Mettler-Toledo集团)，SKY-200B恒温摇床(上海苏坤实业有限公司)，GM-0.33A隔膜真空泵、1L溶剂过滤器(天津市津腾实验设备有限公司)，DHG-9246A电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)，KQ5200DV超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)，A11basic分析研磨机，MS3 BASIC小型涡旋混合器(德国IKA集团)，6CHM-901型电热式碧螺春烘干机(浙江省富阳茶叶机械总厂)等。
1.3 试验方法
1.3.1 茶样制备
将电热式碧螺春烘干机升温至180℃，开启风机，投入鲜叶150~180 g，进行热风杀青[先闷后透，约10 min(≥100℃)]，再将茶样转入电热烘箱，80℃烘至足干，冷却后真空密封包装，于-20℃冷冻保存备用。全部供试茶样根据鲜叶来源(茶树品种×采摘季节)可分为乌龙茶品种春季鲜叶样(10份)、乌龙茶品种秋季鲜叶样(10份)、绿茶品种春季鲜叶样(10份)和绿茶品种秋季鲜叶样(10份)，具体茶样编码见表 1。
表 1 茶样编码及其鲜叶来源Table 1. Codes for teas and sample sources样品编码 鲜叶来源 OS01 肉桂春季一芽二、三叶 OS02 水仙春季一芽二、三叶 OS03 大红袍春季一芽二、三叶 OS04 矮脚乌龙春季一芽二、三叶 OS05 铁观音春季一芽二、三叶 OS06 黄棪春季一芽二、三叶 OS07 梅占春季一芽二、三叶 OS08 白芽奇兰春季一芽二、三叶 OS09 金观音春季一芽二、三叶 OS10 黄观音春季一芽二、三叶 GS01 福鼎大白茶春季一芽二、三叶 GS02 福鼎大毫茶春季一芽二、三叶 GS03 福安大白茶春季一芽二、三叶 GS04 福云6号春季一芽二、三叶 GS05 福云7号春季一芽二、三叶 GS06 福云10号春季一芽二、三叶 GS07 霞浦春波绿春季一芽二、三叶 GS08 九龙大白茶春季一芽二、三叶 GS09 霞浦元宵茶春季一芽二、三叶 GS10 早春毫春季一芽二、三叶 OA01 肉桂秋季一芽二、三叶 OA02 水仙秋季一芽二、三叶 OA03 大红袍秋季一芽二、三叶 OA04 矮脚乌龙秋季一芽二、三叶 OA05 铁观音秋季一芽二、三叶 OA06 黄棪秋季一芽二、三叶 OA07 梅占秋季一芽二、三叶 OA08 白芽奇兰秋季一芽二、三叶 OA09 金观音秋季一芽二、三叶 OA10 黄观音秋季一芽二、三叶 GA01 福鼎大白茶秋季一芽二、三叶 GA02 福鼎大毫茶秋季一芽二、三叶 GA03 福安大白茶秋季一芽二、三叶 GA04 福云6号秋季一芽二、三叶 GA05 福云7号秋季一芽二、三叶 GA06 福云10号秋季一芽二、三叶 GA07 霞浦春波绿秋季一芽二、三叶 GA08 九龙大白茶秋季一芽二、三叶 GA09 霞浦元宵茶秋季一芽二、三叶 GA10 早春毫秋季一芽二、三叶 1.3.2 茶样预处理
准确称取0.200 g粉碎茶样(过40目筛，其干物质含量参照GB/T 8303-2002中120℃烘干法进行测定)于20 mL具塞刻度试管中，加入10 mL 50%乙腈水溶液(v/v)，超声混匀(5 min)，置恒温摇床振荡提取40 min(30℃、120 r·min-1)；静置60 min后，将上清液定容至10 mL，用0.2%甲酸水溶液(v/v)稀释10倍后，0.45 μm有机膜过滤待测。
1.3.3 色谱分析条件
色谱柱：TSKgel ODS-100Z(4.6 mm I. D. × 150 mm，粒径：5 μm，日本Tosoh)，柱温：40℃；流动相：0.2%甲酸水溶液(v/v)(A相)和甲醇(B相)线性梯度洗脱，流速1.0 mL·min-1；检测波长：280 nm；进样量：10 μL。洗脱程序：83% A、17%B(0 min)→50% A、50% B(16 min)→83% A、17%B(18 min)→83% A、17%B(21 min)；数据截留时间：16 min。
1.4 数据统计分析
预先将化学工作站ChemStation B.04.03创建的供试茶样数据文件转换成标准AIA格式文件，而后导入到化学指纹图谱系统解决方案软件ChemPattern 2017[科迈恩(北京)科技有限公司]和SIMCA14.1(包含Omics skin，德国Sartorius Stedim Biotech集团)进行可视化统计模式识别和差异特征成分筛选。
2. 结果与分析
2.1 供试茶样儿茶素类和嘌呤碱指纹图谱的模式识别
茶树鲜叶中的多酚类和嘌呤碱含量易受茶树品种、产地环境、农艺措施、采摘季节和收获方式等诸多因素影响[15-18]。本试验集中种植的乌龙茶品种与绿茶品种生长树龄和生态环境较为一致，但由于存在品种特性、采摘季节和栽培管理等方面差异，各供试茶样的儿茶素类和嘌呤碱呈现出不同的指纹轮廓(图 1)。在茶叶加工过程中，茶多酚将发生不同程度的氧化、裂解和异构化[19-20]。因此，茶样制备方法将在一定程度上影响了茶鲜叶中儿茶素类的准确测定[21-22]。由图 2可以看出，40份供试茶样共检出31个特征峰，且GCG和GC峰面积相对较低，据此表明本试验采用的样品前处理方法可有效防止鲜叶原有表型儿茶素类在样品制备过程中发生非表型差向异构化。在数据处理分析过程中，过多的特征峰面积缺失值(零值)将降低统计效率，并使可视化模式识别结果产生偏倚[23]。因此，本研究根据鲜叶来源(茶树品种×采摘季节)分组，按缺失值“80%规则”[24]剔除无效特征峰(剩余18个特征峰的峰面积缺失值用数据矩阵中最小值的1/2所替代)，再将该数据二维列表用于各供试茶样儿茶素类和嘌呤碱指纹图谱的可视化模式识别。
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图 1 供试茶样儿茶素类和嘌呤碱HPLC指纹纵向叠加图谱注：自上而下依次为OS01~OS10，OA01~OA10，GS01~GS10和GA01~GA10。Figure 1. Catechin and purine alkaloid fingerprints of tea samples stacked in vertical pattern![]()
图 2 40份供试茶样儿茶素类和嘌呤碱HPLC指纹图谱共有模式(高斯曲线)Figure 2. Common pattern expressed by Gaussian equation on catechin and purine alkaloid fingerprints from 40 tea samples采用基于变量UV-scaling标度化预处理的主成分分析(PCA)结果表明，全部供试茶样儿茶素类和嘌呤碱指纹图谱的化学模式可用3个主成分来刻画，其方差贡献度分别为31.85%、23.36%和12.24%，累积方差贡献度达67.45%。由图 3可以看出：乌龙茶品种与绿茶品种鲜叶样存在良好的类群区分，且有明显的季节性差异；乌龙茶品种鲜叶样在主成分得分二维视图和三维空间的样本分布较为离散，亦即乌龙茶品种鲜叶样的儿茶素类和嘌呤碱指纹图谱具有较大的组成和含量变化。
为进一步比较不同来源鲜叶样的组群差异，经变量Par-scaling标度化预处理的正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)结果显示，该建模方法能有效放大乌龙茶品种鲜叶样与绿茶品种鲜叶样、乌龙茶品种春季鲜叶样与秋季鲜叶样的组间差异(图 4-A1和图 4-A2)，其中模型1(M1)的R2X、R2Y和Q2Y分别为0.765、0.975、0.936，模型2(M2)的R2X、R2Y和Q2Y分别为0.508、0.904、0.775。交叉验证残差的方差分析(CV-ANOVA)和置换检验(Permutation Test，n =200)对模型的有效性检验结果显示，M1和M2均具良好的预测能力[其中P(M1)=1.41×10-14，P(M2)=9.32×10-5]，且不存在模型过拟合问题(图 4-B1和图 4-B2)。
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图 4 正交偏最小二乘判别分析注：A为得分图，A1为乌龙茶品种vs.绿茶品种，A2为春季鲜叶vs.秋季鲜叶(乌龙茶品种)；B为置换检验，B1为乌龙茶品种vs.绿茶品种，B2为春季鲜叶vs.秋季鲜叶(乌龙茶品种)。Figure 4. Orthogonal partial least squares discriminant analysis2.2 适制乌龙茶和绿茶品种鲜叶的差异特征成分筛选
通过不同来源鲜叶样差异特征峰的火山图(Volcano plot)可以看出：乌龙茶品种相较绿茶品种鲜叶样拥有更为丰富的儿茶素类和嘌呤碱组分(图 5-A1)；乌龙茶品种春季鲜叶样中的色谱峰#11(Peak 11)、色谱峰#10(Peak 10)、色谱峰#22(Peak 22)、色谱峰#5(Peak5)和CAF含量较高，而秋季鲜叶样中则以色谱峰#28(Peak28)、色谱峰#29(Peak 29)、EGC、和色谱峰#1(Peak 1)含量相对较高(图 5-A2)。基于正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型绘制S-plot，并结合变量投影重要性(VIPpred＞1)、带Jack-knifed置信区间的载荷图和t检验(P＜0.05)分析结果可知，色谱峰#1(Peak 1)、CAF、TB、ECG、C和EGC为区分乌龙茶品种与绿茶品种鲜叶样的主要差异标志物(图 5-B1)，而色谱峰#10(Peak 10)、色谱峰#11(Peak 11)、色谱峰#22(Peak 22)、色谱峰#5(Peak 5)和色谱峰#29(Peak 29)、色谱峰#28(Peak 28)、色谱峰#1(Peak 1)、EGC则可视为鉴别乌龙茶品种春季鲜叶样与秋季鲜叶样的重要差异标志物(图 5-B2)。
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图 5 不同来源茶鲜叶儿茶素类和嘌呤碱指纹特征的差异分析注：A为火山图，A1为乌龙茶品种vs.绿茶品种，A2为春季鲜叶vs.秋季鲜叶(乌龙茶品种)；B为S形曲线，B1为乌龙茶品种vs.绿茶品种，B2为春季鲜叶vs.秋季鲜叶(乌龙茶品种)。图A1中的红色三角形表示该成分在乌龙茶品种鲜叶样中含量较高，且与绿茶品种鲜叶样存在显著性水平差异(P < 0.05)；A2中的红色三角形表示该成分在乌龙茶品种春季鲜叶样中含量较高，而蓝色正方形表示该成分在乌龙茶品种秋季鲜叶样中含量较高，且二者存在显著性水平差异(P < 0.05)。B1的红色圆形为区分乌龙茶品种与绿茶品种鲜叶样的主要差异成分；图B2的红色圆形为鉴别乌龙茶品种春季鲜叶样与秋季鲜叶样的主要差异成分。Figure 5. Discriminant components obtained from catechin and purine alkaloid fingerprints of various tea samples3. 讨论
儿茶素类是茶多酚的主体成分，约占多酚类总量的60%~80%[25-26]。茶鲜叶中的儿茶素类主要包括EGCG、ECG、EGC和EC，且以EGCG含量最为丰富[27]。已有研究表明，适制乌龙茶品种在新梢生育过程中以EGC含量变化最为明显，其次为EGCG和CAF[28]；当其萌长至中、小开面2~4叶时，除可溶性糖有明显增加外，其他生化成分(尤其是EGCG和茶氨酸)含量均趋减少[29]。传统乌龙茶品种生化鉴定样品的制备并非参照乌龙茶鲜叶加工采制要求，而是选择在春茶第一轮新梢伸长至一芽二叶平展时采摘一芽二叶，进行蒸青(或热风)固样及检测分析[30-31]。本试验中，通过PCA得分视图可将40份一芽二、三叶供试茶样划分成乌龙茶品种春季鲜叶样、乌龙茶品种秋季鲜叶样及绿茶品种(春季和秋季)鲜叶样3种类群；采用OPLS-DA建模能进一步放大和验证这种组间差异。由此可见，基于该采摘标准的茶鲜叶儿茶素类和嘌呤碱指纹图谱构建适用于乌龙茶品种与绿茶品种的分类识别。
茶多酚及其氧化产物和CAF均为茶汤重要呈味物质，绿茶多酚的儿茶素组成比例、红茶多酚氧化产物(茶黄素和茶红素等)及其与咖啡因形成的络合物等常可作为衡量茶叶品质的主要生化指标[32-35]。为此，本试验对适制乌龙茶和绿茶品种幼嫩鲜叶的主要水溶性成分(儿茶素类和嘌呤碱)指纹图谱作局部轮廓剖析，但关于适制乌龙茶与绿茶品种鲜叶生化特征还有待进一步研究。此外，适制乌龙茶鲜叶原料一般采摘自顶芽形成驻芽的中、小开面二至四叶茶树嫩梢，这与其他茶类对鲜叶原料的嫩度要求存在较大差异[36]。Lee等[37]采用核磁共振氢谱(H-NMR)对绿茶品种新梢不同叶位进行了代谢组分析，结果发现不同嫩度叶片有着明显的代谢区分，且叶片越幼嫩，茶氨酸、CAF、GA越高，儿茶素类累积越少，而嫩茎中则含有更为丰富的茶氨酸和较少的儿茶素类。Samanta等[38]研究发现，鲜叶中的代谢物在叶片成熟过程中发生了显著性变化，如ECG、EGCG含量和儿茶素总量伴随着叶片成熟而下降，EC和EGC则呈相反趋势。现大多数乌龙茶新品种在生产上亦为红茶、绿茶等多茶类兼适用种，且所制产品常有较高的花香品质，故基于不同芽叶嫩度的茶鲜叶初级和次生代谢物高通量检测分析，并通过多元化学模式识别以实现茶树品种茶类适制性鉴别仍有待进一步探究。
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图 1 供试茶样儿茶素类和嘌呤碱HPLC指纹纵向叠加图谱
注：自上而下依次为OS01~OS10，OA01~OA10，GS01~GS10和GA01~GA10。
Figure 1. Catechin and purine alkaloid fingerprints of tea samples stacked in vertical pattern
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图 2 40份供试茶样儿茶素类和嘌呤碱HPLC指纹图谱共有模式(高斯曲线)
Figure 2. Common pattern expressed by Gaussian equation on catechin and purine alkaloid fingerprints from 40 tea samples
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图 4 正交偏最小二乘判别分析
注：A为得分图，A1为乌龙茶品种vs.绿茶品种，A2为春季鲜叶vs.秋季鲜叶(乌龙茶品种)；B为置换检验，B1为乌龙茶品种vs.绿茶品种，B2为春季鲜叶vs.秋季鲜叶(乌龙茶品种)。
Figure 4. Orthogonal partial least squares discriminant analysis
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图 5 不同来源茶鲜叶儿茶素类和嘌呤碱指纹特征的差异分析
注：A为火山图，A1为乌龙茶品种vs.绿茶品种，A2为春季鲜叶vs.秋季鲜叶(乌龙茶品种)；B为S形曲线，B1为乌龙茶品种vs.绿茶品种，B2为春季鲜叶vs.秋季鲜叶(乌龙茶品种)。图A1中的红色三角形表示该成分在乌龙茶品种鲜叶样中含量较高，且与绿茶品种鲜叶样存在显著性水平差异(P < 0.05)；A2中的红色三角形表示该成分在乌龙茶品种春季鲜叶样中含量较高，而蓝色正方形表示该成分在乌龙茶品种秋季鲜叶样中含量较高，且二者存在显著性水平差异(P < 0.05)。B1的红色圆形为区分乌龙茶品种与绿茶品种鲜叶样的主要差异成分；图B2的红色圆形为鉴别乌龙茶品种春季鲜叶样与秋季鲜叶样的主要差异成分。
Figure 5. Discriminant components obtained from catechin and purine alkaloid fingerprints of various tea samples
表 1 茶样编码及其鲜叶来源
Table 1 Codes for teas and sample sources
样品编码 鲜叶来源 OS01 肉桂春季一芽二、三叶 OS02 水仙春季一芽二、三叶 OS03 大红袍春季一芽二、三叶 OS04 矮脚乌龙春季一芽二、三叶 OS05 铁观音春季一芽二、三叶 OS06 黄棪春季一芽二、三叶 OS07 梅占春季一芽二、三叶 OS08 白芽奇兰春季一芽二、三叶 OS09 金观音春季一芽二、三叶 OS10 黄观音春季一芽二、三叶 GS01 福鼎大白茶春季一芽二、三叶 GS02 福鼎大毫茶春季一芽二、三叶 GS03 福安大白茶春季一芽二、三叶 GS04 福云6号春季一芽二、三叶 GS05 福云7号春季一芽二、三叶 GS06 福云10号春季一芽二、三叶 GS07 霞浦春波绿春季一芽二、三叶 GS08 九龙大白茶春季一芽二、三叶 GS09 霞浦元宵茶春季一芽二、三叶 GS10 早春毫春季一芽二、三叶 OA01 肉桂秋季一芽二、三叶 OA02 水仙秋季一芽二、三叶 OA03 大红袍秋季一芽二、三叶 OA04 矮脚乌龙秋季一芽二、三叶 OA05 铁观音秋季一芽二、三叶 OA06 黄棪秋季一芽二、三叶 OA07 梅占秋季一芽二、三叶 OA08 白芽奇兰秋季一芽二、三叶 OA09 金观音秋季一芽二、三叶 OA10 黄观音秋季一芽二、三叶 GA01 福鼎大白茶秋季一芽二、三叶 GA02 福鼎大毫茶秋季一芽二、三叶 GA03 福安大白茶秋季一芽二、三叶 GA04 福云6号秋季一芽二、三叶 GA05 福云7号秋季一芽二、三叶 GA06 福云10号秋季一芽二、三叶 GA07 霞浦春波绿秋季一芽二、三叶 GA08 九龙大白茶秋季一芽二、三叶 GA09 霞浦元宵茶秋季一芽二、三叶 GA10 早春毫秋季一芽二、三叶 
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