哈路比葡萄柚茎段的组培快速繁殖

叶维雁; 刘惠民; 刘月; 唐军荣; 李贤忠; 李文兵; 夏赛

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2017.02.009

哈路比葡萄柚茎段的组培快速繁殖

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2017.02.009

叶维雁^{1, 2,},
刘惠民^1, ,,
刘月¹,
唐军荣¹,
李贤忠¹,
李文兵¹,
夏赛¹

1.
西南林业大学国家林业局西南地区生物多样性保育重点实验室, 云南昆明 650224
2.
广西壮族自治区亚热带作物研究所, 广西南宁 530001

基金项目:

国家国际科技合作专项项目 2014DFA31060

详细信息

作者简介:
叶维雁 (1988-), 男, 硕士, 主要从事果树生物技术等研究工作 (E-mail: flyingywy@163.com)

通讯作者:
刘惠民 (1957-), 男, 博士, 教授, 主要从事经济林栽培与利用等研究工作 (E-mail: hmliu@swfu.edu.cn)

中图分类号: S666.3
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出版历程
- 收稿日期: 2016-07-19
- 修回日期: 2016-11-30
- 刊出日期: 2017-02-01

Rapid Propagation for Hudson Foster Grapefruit Using Its Stems on Tissue Culture

1.
Key laboratory of Biodiversity Conservation in Southwest China, State Forestry Administration, Southwest Forestry University, Kunming, Yunnan 650224, China
2.
Guangxi Subtropical Crops Research Institute, Nanning, Guangxi 530001, China

摘要

摘要: 以成年态葡萄柚的茎段为材料，研究不同激素组合、基本培养基对丛生芽增殖的影响，以及再生苗生根、炼苗与移栽技术。结果表明:（1）WPM+6-BA 1.0 mg·L^-1 +NAA 0.2 mg·L^-1 +蔗糖40 g·L^-1 为初代培养的最佳培养基，腋芽诱导率达78.33%；（2）继代增殖的最适培养基为WPM+6-BA 0.75 mg·L^-1 +NAA 0.2 mg·L^-1 +蔗糖40 g·L^-1 ，增殖系数达4.93，芽长达2.62 cm；（3）培养基1/2WPM+NAA 0.1 mg·L^-1 +IBA 1.0 mg·L^-1 +蔗糖40 g·L^-1 +AC 0.1%的生根效果最好，生根率达63.33%，株高3.03 cm，根粗壮；（4）生根苗移栽成活率达78%以上。
- 葡萄柚 /
- 组培 /
- 初代诱导 /
- 增殖 /
- 生根
Abstract: Stem segments of adult Hudson Foster grapefruit plants were used as explants to study the effect of hormones on the primary culture of axillary shoots, as well as that of hormones and media on the proliferation of clustered shoots. In addition, an attempt was made to refine the techniques on rooting, hardening and transplanting of the plantlets. The results showed that :(1) the optimized medium for primary culture was WPM+1.0 mg·L^-1 6-BA/L+0.2 mg·L^-1 NAA/L+40 g·L^-1 to achieve up to 78.33% induction rate of axillary shoots; (2) the optimized medium for subculture multiplication was WPM+0.75 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+40 g·L^-1 sucrose to reach a multiplication coefficient of 4.93 with a shoot length of 2.62 cm; (3) the optimized medium for rooting was 1/2WPM+0.1 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 IBA+40 g·L^-1 sucrose+0.1% AC to obtain strong roots at a rooting rate of 63.33% with a plant height up to 3.03 cm; (4) the survival rate of transplanted plantlets after rooting was greater than 78%.
- grapefruit /
- tissue culture /
- primary culture /
- proliferation /
- rooting

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图 1 葡萄柚组织培养过程

注：A为腋芽诱导，B为丛生芽增殖，C为生根苗，D为移栽苗。

Figure 1. Process of tissue culture for Hudson Foster grapefruit

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表 1 不同激素对腋芽诱导的影响

Table 1. Effect of hormones on induction of axillary shoots

处理	激素质量浓度/(mg·L^-1)		诱导率/%	叶色	培养情况
处理	6-BA	NAA	诱导率/%	叶色	培养情况
1	0.5	0	30.00±5.00Ccd	+	芽细弱
2	0.5	0.1	53.33±7.64Bb	+++	芽的长势一般
3	0.5	0.2	55.00±8.66Bb	+++	芽的长势一般
4	1.0	0	36.67±5.77Ccd	+	芽细弱
5	1.0	0.1	75.00±10.00Aa	+++	芽粗壮
6	1.0	0.2	78.33±2.89Aa	+++	芽粗壮
7	1.5	0	35.00±5.00Ccd	+	芽细弱
8	1.5	0.1	71.67±5.77Aa	++	芽的长势一般
9	1.5	0.2	73.33±7.64Aa	++	芽的长势一般
10	2.0	0	25.00±8.66Cd	+	芽细弱、轻微玻璃化
11	2.0	0.1	40.00±5.00BCc	+	芽细弱、轻微玻璃化
12	2.0	0.2	41.67±5.77BCc	+	芽细弱、轻微玻璃化
注：同列数据后不同大、小写字母表示差异达极显著 (P < 0.01) 或显著 (P < 0.05) 水平。表 2~5同。叶色：+++为深绿色，++为绿色，+为浅绿色。

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表 2 不同浓度6-BA对增殖培养的影响

Table 2. Effect of 6-BAconcentration on plantlet proliferation

处理	激素质量浓度/(mg·L^-1)		增殖系数	芽长/cm	生长情况
处理	6-BA	NAA	增殖系数	芽长/cm	生长情况
CK	0.00	0.00	1.00±0.00Ff	无	无
1	0.25	0.20	2.92±0.10Ee	1.35±0.05Ee	芽浅绿色、细弱，叶片中等大小
2	0.50	0.20	4.50±0.10Bb	2.40±0.03Cc	芽深绿色，叶片大
3	0.75	0.20	4.92±0.13Aa	2.61±0.05Bb	芽深绿色、粗壮，叶片大
4	1.00	0.20	4.42±0.08Bb	2.56±0.05Bb	芽深绿色、粗壮，叶片大
5	1.25	0.20	4.02±0.10Cc	2.09±0.05Dd	芽绿色，叶片中等大小
6	1.50	0.20	3.63±0.08Dd	1.26±0.03Ef	芽浅绿色、细弱，叶片小

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表 3 不同质量浓度NAA和IBA对增殖培养的影响

Table 3. Effect of NAA and IBA concentrations on plantlet proliferation

处理	激素质量浓度/(mg·L^-1)			增殖系数	芽长/cm	生长情况
处理	6-BA	NAA	IBA	增殖系数	芽长/cm	生长情况
1	0.75	0.00	0.00	3.00±0.05Ef	1.37±0.03Ee	芽浅绿色、细弱，叶片小
2	0.75	0.05	0.00	3.87±0.08Bc	1.96±0.03Dd	芽绿色，叶片中等大小
3	0.75	0.10	0.00	4.80±0.10Ab	2.42±0.03BCb	芽深绿色、粗壮，叶片大
4	0.75	0.20	0.00	4.93±0.06Aa	2.62±0.05Aa	芽深绿色、粗壮，叶片大
5	0.75	0.40	0.00	3.68±0.10CDd	2.40±0.03BCb	芽绿色，叶片中等大小
6	0.75	0.00	0.05	3.35±0.09e	1.98±0.02Dd	芽浅绿色、细弱，叶片小
7	0.75	0.00	0.10	3.63±0.03Dd	2.34±0.02Cc	芽深绿色，叶片大
8	0.75	0.00	0.20	3.85±0.05BCc	2.44±0.05Bb	芽深绿色、粗壮，叶片大
9	0.75	0.00	0.40	3.33±0.06De	1.98±0.03Dd	芽浅绿色，叶片中等大小

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表 4 不同基本培养基对增殖培养的影响

Table 4. Effect of media on plantlet proliferation

处理	基本培养基	增殖系数	芽长/cm	生长情况
1	WPM	4.97±0.10Aa	2.61±0.02Aa	芽深绿色、粗壮，叶片大
2	MS	3.03±0.10Cc	2.23±0.03Bb	芽绿色，叶片大
3	MT	3.70±0.15Bb	2.15±0.05Bc	芽深绿色、粗壮，叶片大
4	MT₂	2.85±0.09Cc	1.04±0.04Cd	芽浅绿色、细弱，叶片小

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表 5 不同生长素组合对生根的影响

Table 5. Effect of auxin combinations on rooting of plantlets

处理	激素质量浓度/(mg·L^-1)		生根率/%	株高/cm	生长情况
处理	NAA	IBA	生根率/%	株高/cm	生长情况
CK	0.0	0.0	0.00±0.00Cc	2.39±0.03De	无
1	0.1	0.2	36.67±5.77Bb	2.51±0.02Cd	+
2	0.1	0.5	50.00±10.00ABab	2.83±0.03Bc	++
3	0.1	1.0	63.33±5.77Aa	3.03±0.02Aa	+++
4	0.1	1.5	46.67±11.55ABb	2.88±0.02Bb	++
注：根生长情况：+++为极粗壮，++为较粗壮，+为粗壮。

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参考文献(18)

[1]	郭林榕, 陈文光, 熊月明.葡萄柚的产销及发展前景[J].福建果树, 2002, (3): 34-35. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-FJGS200203017.htm
[2]	吴海波, 刘惠民.葡萄柚的栽培及研究概况[J].经济林研究, 2005, (1): 69-73. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-JLYJ200501022.htm
[3]	李贤忠, 刘惠民, 姜超强, 等.引进葡萄柚营养状况与果实品质的相关性[J].经济林研究, 2008, 26(2): 17-22. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-JLYJ200802003.htm
[4]	姜超强, 刘惠民.云南引进葡萄柚品种果实品质评价[J].西南林学院学报, 2007, 27(1): 30-32. doi: 10.11929/j.issn.2095-1914.2007.01.007
[5]	邓佳, 张晓敏, 严毅, 等.旱季不同水肥管理对葡萄柚果实营养品质的影响[J].西北林学院学报, 2014, 29(2): 129-134. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-XBLX201402024.htm
[6]	史海芝, 刘惠民, 李贤忠.引进美国葡萄柚果实营养分析[J].山东林业科技, 2009, (2): 28-31. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-TREE200902010.htm
[7]	李贤忠, 刘惠民, 金德良, 等.美国葡萄柚营养成分分析与评价[J].经济林研究, 2006, 24(4): 23-27. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-JLYJ200604004.htm
[8]	刘惠民, 阚欢, 李贤忠, 等.云南葡萄柚果汁的加工工艺研究[J].中南林业科技大学学报, 2008, 28(4): 145-147, 158. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZNLB200804028.htm
[9]	严毅, 张南新, 何承忠, 等.葡萄柚不同砧木嫁接亲和性与保护酶活性相关性分析[J].北方园艺, 2012, (11): 8-11. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-BFYY201211004.htm
[10]	陆荣生, 韩美丽, 霍秀娟, 等.葡萄柚不定芽再生体系建立研究[J].江西农业学报, 2013, 25(6): 35-38. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-JXNY201306008.htm
[11]	叶维雁, 郭晓月, 刘惠民, 等.葡萄柚种子无菌苗组培快繁体系的建立[J].广西植物, 2015, 35(6): 891-898. doi: 10.11931/guihaia.gxzw201411013
[12]	王彩霞.柑橘成年态茎段培养技术体系研究[J].广东农业科学, 2009, (1): 47-49. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-GDNY200901017.htm
[13]	张家银, 郭琛, 谢玉明, 等.椪柑成年态节间茎段再生体系的建立[J].湖南农业大学学报:自然科学版, 2008, 34(2): 182-185. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-HNND200802018.htm
[14]	金建涛, 赖钟雄, 刘生财, 等.尤溪金柑离体再生体系优化及试管苗保存[J].福建农林大学学报:自然科学版, 2014, 43(3): 256-262. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-FJND201403007.htm
[15]	王彩霞.植物生长调节剂对3个柑橘品种形态建成的影响[J].中国农学通报, 2009, 25(2): 16-19. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZNTB200902007.htm
[16]	刘文龙, 李进进, 陈升云, 等.柑橘试管内微芽嫁接方法探讨[J].广东轻工职业技术学院学报, 2009, 8(3):14-16, 20. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-GDQG200903006.htm
[17]	徐定华, 张攀, 范志帷, 等.红心柚外植体无菌系建立的初步研究[J].福建果树, 2007, (1): 15-17. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-FJGS200701005.htm
[18]	李浚明.植物组织培养教程[M].北京:中国农业大学出版社, 1996.