盆花文心兰丛生芽组培快繁技术研究

叶秀仙; 黄敏玲; 罗远华; 林榕燕; 钟淮钦

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2016.11.011

盆花文心兰丛生芽组培快繁技术研究

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2016.11.011

叶秀仙^{1, 2, 3,},
黄敏玲^{1, 2, 3, ,},
罗远华^{1, 2, 3},
林榕燕^{1, 2, 3},
钟淮钦^{1, 2, 3}

1.
福建省农业科学院作物研究所, 福建福州 350013
2.
福建省农业科学院花卉研究中心, 福建福州 350013
3.
福建省特色花卉工程技术研究中心, 福建福州 350013

基金项目:

福建省财政专项——福建省农业科学院科技创新团队PI项目 2016PI-39

福建省种业创新与产业化工程项目 2014S1477-14

福建省花卉苗木品种引进与研发创新项目闽林种站[2013]42号

详细信息

作者简介:
叶秀仙(1977-),女,副研究员,主要从事花卉组织培养技术研究(E-mail:yxx7861@163.com)

通讯作者:
黄敏玲(1960-),女,研究员,主要从事花卉品种选育与生物技术研究(E-mail:huangml618@163.com)

中图分类号: S68
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出版历程
- 收稿日期: 2016-07-02
- 修回日期: 2016-08-14
- 刊出日期: 2016-11-01

Bud Tissue Culture and Rapid Propagation of Potted Flower, Oncidium

YE Xiu-xian^{1, 2, 3
,},
HUANG Min-ling^{1, 2, 3
, ,},
LUO Yuan-hua^{1, 2, 3},
LIN Rong-yan^{1, 2, 3},
ZHONG Huai-qin^{1, 2, 3}

1.
Institute of Crop Sciences, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou, Fujian 350013, China
2.
Flowers Research Center, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou, Fujian 350013, China
3.
Fujian Engineering Research Center for Characteristic Floriculture, Fuzhou, Fujian 350013, China

摘要

摘要: 以文心兰‘豹斑宝石’花梗为外植体，采用丛生芽诱导途径，利用正交设计法，探讨基本培养基（MS、花宝1号、改良1号、改良2号、改良3号）、植物生长调节剂（6-BA、NAA、IBA）、水解酪蛋白（CH）等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响，以期建立文心兰‘豹斑宝石’丛生芽组培快繁技术。结果表明：各试验因素对文心兰丛生芽增殖影响的主次关系为6-BA > 基本培养基 > NAA > CH；筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良1号+6-BA 3.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+CH 0.5 g·L^-1+白糖30 g·L^-1+琼脂粉5.0 g·L^-1，50 d平均增殖系数达5.8；筛选出适宜生根的培养基配方为改良3号+IBA 0.5 mg·L^-1+活性碳0.5 g·L^-1+白糖20 g·L^-1+琼脂粉3.6 g·L^-1+卡拉胶3.6 g·L^-1，生根率为100.0%；试管苗移栽6个月成活率达96.8%。
- 文心兰 /
- 丛生芽 /
- 正交设计 /
- 组织培养
Abstract: The peduncle axillary buds of Zelglossoda Calico Gem, Green Valley #1, were used as explants for the study. The bud clumps induction pathway was experimented with orthogonal design to study the effects of the key factors, such as culture medium (i.e., MS, Hyponex #1, Improvement #1, Improvement #2, and Improvement #3), phytohormone (i.e., 6-BA, NAA, and IBA), and CH, on the plant growth during the induction, propagation, and rooting stages. The results showed that the main factors affecting the bud multiplication included 6-BA, basic medium, NAA, and CH. The optimal growth was observed under the use of the combination of Improvement #1 medium, 6-BA 3.0 mg·L^-1, NAA 0.1 mg·L^-1, CH 0.5 g·L^-1 and agar powder 5.0 g·L^-1 to result in an averaged propagation coefficient of 5.8 in 50 days. For the rooting, Improvement #3 with added IBA 0.5 mg·L^-1,AC 0.5 g·L^-1, sugar 20 g·L^-1,agar 3.6 g·L^-1 and carrageenan 3.6 g·L^-1 was the best with a 100.0% rooting rate. The survival rate of the plantlets in 6 months after transplanting from the test tubes was 96.8%.
- Oncidium /
- bud clumps /
- orthogonal design /
- tissue culture

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图 1 丛生芽大量增殖

Figure 1. Massive propagation from bud clumps

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图 2 生根培养75 d时生长表现

Figure 2. Rooting performance after 75 days

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图 3 温室驯化炼苗

Figure 3. Greenhouse acclimation

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图 4 5.0 cm育苗杯种植

Figure 4. Planting seedlings in 5.0 cm cups

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图 5 移栽种植6个月时生长表现情况

Figure 5. Growth performance of plantlets in 6 months after transplantation

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图 6 11 cm育苗杯换盆种植生长表现情况

Figure 6. Growth performance of seedlings repotted to 11 cm pots

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表 1 L₁₆ (4⁴ ) 因素及水平

Table 1. L₁₆ (4⁴) factors and levels of orthogonal experimentation

编号	A：基本培养基	B：6-BA/ (mg·L^-1)	C：NAA/ (mg·L^-1)	D：CH/ (g·L^-1)
1	MS	0.5	0.05	0
2	花宝1号	1.0	0.1	0.2
3	改良1号	2.0	0.2	0.5
4	改良2号	3.0	0.4	1.0

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表 2 ‘豹斑宝石’丛生芽增殖L₁₆ (4⁴ )正交试验设计与极差分析结果

Table 2. Orthogonal experiment results

处理	因素				丛生芽平均增殖系数
处理	A	B	C	D	丛生芽平均增殖系数
1	MS	0.5	0.05	0	3.1
2	MS	1.0	0.1	0.2	3.5
3	MS	2.0	0.2	0.5	4.1
4	MS	3.0	0.4	1.0	4.9
5	花宝1号	0.5	0.1	1.0	2.9
6	花宝1号	1.0	0.05	0.5	3.0
7	花宝1号	2.0	0.4	0.2	3.3
8	花宝1号	3.0	0.2	0	4.0
9	改良1号	0.5	0.2	0.2	3.2
10	改良1号	1.0	0.4	0	4.5
11	改良1号	2.0	0.05	1.0	5.2
12	改良1号	3.0	0.1	0.5	5.8
13	改良2号	0.5	0.4	0.5	4.1
14	改良2号	1.0	0.2	1.0	3.1
15	改良2号	2.0	0.1	0	4.5
16	改良2号	3.0	0.05	0.2	4.8
k₁	3.900	3.325	4.025	3.825
k₂	3.300	3.525	4.175	4.200
k₃	4.675	4.275	3.600	4.075
k₄	4.125	4.875	4.200	3.900
极差R	1.375	1.550	0.600	0.375
主次顺序	B>A>C>D
优水平	A₃	B₄	C₂	D₃
优组合	A₃ B₄ C₂ D₃
注：表中因素A为基本培养基；B为6-BA/(mg·L^-1)；C为NAA/(mg·L^-1)；D为CH/(g·L^-1)。

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表 3 ‘豹斑宝石’丛生芽增殖系数方差分析结果

Table 3. Analysis of variance on propagation rate

因素	SS	df	F	F_0.05	显著性	F_0.10	显著性
A：基本培养基	3.885	3	6.317	9.280		5.390	*
B：6-BA	6.090	3	9.902	9.280	*	5.390	*
C：NAA	0.925	3	1.504	9.280		5.390
D：CH	0.345	3	0.561	9.280		5.390
误差	0.61	3

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表 4 不同浓度的NAA和IBA对试管苗生根培养的影响

Table 4. Effect of NAA and IBA concentrations on plantlet rooting in test tube

处理	NAA+ IBA/ (mg·L^-1)	接种株数 /株	生根株数 /株	生根率 /%	诱导生根情况
1	0.2+0	150	132	88.0 d	21 d左右开始生根，平均生根数3.7条，平均根长2.1 cm，根较细弱
2	0.5+0	150	143	95.3 b	14 d左右开始生根，平均生根数4.2条，平均根长2.5 cm，根细弱
3	0+0.2	150	139	92.6 bc	14 d左右开始生根，平均生根数4.5条，平均根长2.3 cm，根较粗壮
4	0+0.5	150	150	100.0 a	7 d左右开始生根，平均生根数8.5条，平均根长3.6 cm，根粗壮，呈放射壮
5	0.2+ 0.2	150	150	100.0 a	7 d左右开始生根，平均生根数6.3条，平均根长2.8 cm，根较粗壮，呈放射壮
6	0.5+ 0.5	150	150	100.0 a	7 d左右开始生根，平均生根数8.2条，平均根长3.8 cm，根细长
注：LSD检验，不同小写字母表示显著性差异(P≤0.05)。

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表 5 文心兰试管苗移栽生长表现

Table 5. Growth performance of transplanted plantlets from test tubes

移栽时间 /月	株高 /cm	叶片数 /片	叶宽 /cm	假鳞茎/cm		移栽或换盆成活率/%	生长表现
移栽时间 /月	株高 /cm	叶片数 /片	叶宽 /cm	长	宽	移栽或换盆成活率/%	生长表现
0	10.6	6.5	0.6	/	/	/	/
2	11.9	6.6	0.8	/	/	100.0	恢复生长
4	13.5	6.7	0.9	/	/	100.0	假鳞茎逐渐形成
6	14.9	7.7	1.5	2.7	1.3	96.8	1/3植株形成假鳞茎，生长势强，根系生长良好
8	19.1	7.8	2.2	3.3	2.4	100.0	3/4植株形成假鳞茎，换3.5寸育苗杯后，侧芽开始萌发，50%植株萌蘖侧芽，芽高度1.5~4.8cm
10	22.0	8.3	2.8	3.6	3.2	100.0	90%植株萌蘖侧芽1~2个，芽高度3.5~13.5cm
12	23.2	8.9	3.1	4.1	3.6	100.0	98%植株萌蘖侧芽1~2个，芽高度5.5~16.0cm

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参考文献(15)

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