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表达PRRSV GP2a/GP2b、GP3、GP4、GP5和M蛋白重组腺病毒的构建

陈振海 林天龙 俞伏松 宋铁英 龚晖 方勤美 杨金先

陈振海, 林天龙, 俞伏松, 宋铁英, 龚晖, 方勤美, 杨金先. 表达PRRSV GP2a/GP2b、GP3、GP4、GP5和M蛋白重组腺病毒的构建[J]. 福建农业学报, 2007, 22(3): 221-226.
引用本文: 陈振海, 林天龙, 俞伏松, 宋铁英, 龚晖, 方勤美, 杨金先. 表达PRRSV GP2a/GP2b、GP3、GP4、GP5和M蛋白重组腺病毒的构建[J]. 福建农业学报, 2007, 22(3): 221-226.
CHEN Zhen-hai, LIN Tian-long, YU Fu-song, SONG Tie-ying, GONG Hui, FANG Qin-mei, YANG Jin-xian. Establishment of recombinant adenoviruses for expressing PRRSV GP2a/GP2b,GP3,GP4,GP5,and M proteins[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2007, 22(3): 221-226.
Citation: CHEN Zhen-hai, LIN Tian-long, YU Fu-song, SONG Tie-ying, GONG Hui, FANG Qin-mei, YANG Jin-xian. Establishment of recombinant adenoviruses for expressing PRRSV GP2a/GP2b,GP3,GP4,GP5,and M proteins[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2007, 22(3): 221-226.

表达PRRSV GP2a/GP2b、GP3、GP4、GP5和M蛋白重组腺病毒的构建

基金项目: 

福建省科技重大专项(2006NZ0003-2)

详细信息
    通讯作者:

    林天龙(1955- ),男,研究员,主要从事动物免疫学、动物疾病学研究(E-mail:lint05@163.com).

  • 中图分类号: S858.28;S855.3;Q784

Establishment of recombinant adenoviruses for expressing PRRSV GP2a/GP2b,GP3,GP4,GP5,and M proteins

  • 摘要: 以PRRSV FJ-1a株为模板,采用RT-PCR法分别扩增出GP2a/GP2b-3、GP3、GP4、GP5和M蛋白基因片段,双酶切后插入穿梭质粒pDC316。利用AdMaxTM法,将5个重组穿梭质粒分别与腺病毒辅助质粒共转染293细胞,得到重组腺病毒Ad-GP2a/GP2b-3、Ad-GP3、Ad-GP4、Ad-GP5和Ad-M。重组腺病毒滴度为107.7~109.0TCID50·mL-1,而以Ad-GP5滴度最低,仅为107.7TCID50·mL-1。PCR检测第3、6、9代重组腺病毒稳定性,确证重组病毒均能稳定携带目的基因。对目的基因转录的RT-PCR鉴定结果显示,重组腺病毒分别感染293细胞后能转录产生目的基因mRNA。表达PRRSV主要囊膜蛋白基因重组腺病毒的获得,为进一步研制PRRSV基因工程疫苗,解析主要囊膜蛋白功能奠定基础。
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出版历程
  • 收稿日期:  2007-07-20
  • 修回日期:  2007-08-13
  • 刊出日期:  2007-09-15

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