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H9亚型鸭源禽流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立

万春和 林甦 施少华 林秋敏 陈红梅 程龙飞 傅光华 林芳 林建生 黄瑜

万春和, 林甦, 施少华, 林秋敏, 陈红梅, 程龙飞, 傅光华, 林芳, 林建生, 黄瑜. H9亚型鸭源禽流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立[J]. 福建农业学报, 2010, 25(4): 387-391.
引用本文: 万春和, 林甦, 施少华, 林秋敏, 陈红梅, 程龙飞, 傅光华, 林芳, 林建生, 黄瑜. H9亚型鸭源禽流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立[J]. 福建农业学报, 2010, 25(4): 387-391.
WAN Chun-he, LIN Su, SHI Shao-hua, LIN Qiu-min, CHEN Hong-mei, CHENG Long-fei, FU Guang-hua, LIN Fang, LIN Jian-sheng, HUANG Yu. SYBR GreenⅠ RT-PCR for rapid diagnosis of H9 Subtype Avian Influenza Virus[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2010, 25(4): 387-391.
Citation: WAN Chun-he, LIN Su, SHI Shao-hua, LIN Qiu-min, CHEN Hong-mei, CHENG Long-fei, FU Guang-hua, LIN Fang, LIN Jian-sheng, HUANG Yu. SYBR GreenⅠ RT-PCR for rapid diagnosis of H9 Subtype Avian Influenza Virus[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2010, 25(4): 387-391.

H9亚型鸭源禽流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立

基金项目: 

国家科技支撑计划项目(2006BAD06A01);福建省科技计划重点项目(2009N4001);中央高校基本科研业务费专项资金(2010KLEP001);国家973计划项目(2010CB530303)

详细信息
    通讯作者:

    黄瑜(1965- ),男,研究员,博士,从事动物传染病研究(E-mail:huangyu_815@163.com)

  • 中图分类号: S855.3

SYBR GreenⅠ RT-PCR for rapid diagnosis of H9 Subtype Avian Influenza Virus

  • 摘要: 针对H9亚型禽流感HA基因保守序列设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测模式的荧光定量RT-PCR(real-ti me RT-PCR,RRT-PCR),最低检测限为8.33×102拷贝质粒DNA,与常规PCR相比,灵敏度高出100倍。扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(83.83±0.22)℃,组内变异系数为0.52%~1.48%,组间变异系数为0.71%~2.21%,可重复性好;对H5亚型禽流感病毒、鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、鸭源禽1型副粘病毒无扩增;检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4.5 h。
  • [1] PEIRIS M,YUEN K,LEUNG C,et al.Human infection with influenza H9N2[J].Lancet,1999,354(9182):916-917.
    [2] 万春和,傅光华,程龙飞,等.A/Chicken/Zhejiang/HJ/2007(H9N2) 禽流感病毒全基因测序及遗传进化分析[J].农业生物技术学报,2009,17(5):750-757.
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出版历程
  • 收稿日期:  2010-06-28
  • 修回日期:  2010-08-16
  • 刊出日期:  2010-08-15

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