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一种采用阴离子交换柱快速纯化Taq DNA 聚合酶的方法

余彦 李程勋 陈树清 叶长亮 黄力坤 许铁城 林文雄

余彦, 李程勋, 陈树清, 叶长亮, 黄力坤, 许铁城, 林文雄. 一种采用阴离子交换柱快速纯化Taq DNA 聚合酶的方法[J]. 福建农业学报, 2012, 27(7): 734-738.
引用本文: 余彦, 李程勋, 陈树清, 叶长亮, 黄力坤, 许铁城, 林文雄. 一种采用阴离子交换柱快速纯化Taq DNA 聚合酶的方法[J]. 福建农业学报, 2012, 27(7): 734-738.
YU Yan, LI Cheng-xun, CHEN Shu-qing, YE Chang-liang, HUANG Li-kun, XU Tie-cheng, LIN Wen-xiong. Rapid Purification of Taq DNA Polymerase Using Anion-exchange Column[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2012, 27(7): 734-738.
Citation: YU Yan, LI Cheng-xun, CHEN Shu-qing, YE Chang-liang, HUANG Li-kun, XU Tie-cheng, LIN Wen-xiong. Rapid Purification of Taq DNA Polymerase Using Anion-exchange Column[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2012, 27(7): 734-738.

一种采用阴离子交换柱快速纯化Taq DNA 聚合酶的方法

基金项目: 

国家自然科学基金项目(31271670)

详细信息
    通讯作者:

    林文雄(1957-),男,博士生导师,研究方向:作物生理与分子生态学(E-mail: lwx@fjau.edu.cn)

  • 中图分类号: Q 784

Rapid Purification of Taq DNA Polymerase Using Anion-exchange Column

  • 摘要: 通过37℃恒温振荡培养含有TaqDNA聚合酶基因的E.coli菌株,并用IPTG诱导该基因表达获得TaqDNA聚合酶蛋白,利用40%硫酸铵沉淀该蛋白后溶解于storage buffer中。此法获得的TaqDNA聚合酶带负电荷,因此采用阴离子交换柱纯化蛋白。试验结果表明,此法与传统的透析方法相比能快速地去除生物小分子杂质,同时去除透析方法无法除去的杂蛋白;既能保证TaqDNA聚合酶的生物学活性,同时能缩短纯化时间、提高TaqDNA聚合酶的纯度。以土壤微生物DNA、水稻cDNA为模板进行PCR扩增并对扩增产物进行测序,结果显示纯化后的TaqDNA聚合酶具有较高的扩增效率和保真性。
  • [1] BROCK T D.The value of basic research: discovery of Thermus aquaticus and other extreme thermophiles[J].Genetics,1997,146( 4) : 1207-1210.
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出版历程
  • 收稿日期:  2012-01-12
  • 修回日期:  2012-05-19
  • 刊出日期:  2012-07-30

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