2019年 34卷 第11期
2019, 34(11): 1237-1245.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.001
摘要:
目的 植物通过启动一系列信号传导过程来应对外部环境，这些过程通常涉及多种蛋白激酶，包括钙调神经磷酸酶B样蛋白互作激酶（calcineurin B-like protein-interacting protein kinases, CIPKs）。为更加清晰全面地了解水稻CIPK基因家族，本研究根据最新的基因组测序数据对水稻基因组中的CIPKs进行了鉴定。 方法 通过探讨拟南芥和水稻中CIPKs蛋白家族的结构特点，结合生物信息学和qRT-PCR技术系统分析水稻中CIPKs家族蛋白的结构。结合转录组数据，比较了粳稻云引受稻瘟病菌诱导后的表达情况。 结果 根据最新的水稻基因组数据，鉴定出31个水稻OsCIPK基因。系统发育树分析结果表明，31个OsCIPK基因可分为5个亚家族，这些亚家族具有不同的外显子-内含子和UTR的结构特点。从广谱抗稻瘟病品种粳稻云引受稻瘟病菌诱导的基因表达谱的趋势聚类中筛选出了OsCIPK5基因并对其进行了表达分析，结果表明，云引中OsCIPK5基因受稻瘟病菌的诱导表达。 结论 内含子缺失和片段重复在水稻OsCIPK基因家族的扩展中起到重要作用，同时OsCIPK5受到稻瘟病菌的诱导表达。
2019, 34(11): 1246-1254.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.002
摘要:
目的 研究当前主栽的福建山药地方品种资源主要性状的遗传变异，为优质地方山药资源的开发和品种选育奠定基础。 方法 以37份福建山药地方品种资源为材料，对24个主要性状进行观测分析，并采用多样性分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析等方法进行研究。 结果 数量性状的变异系数为21.01%～68.26%，块茎相关性状变异范围大于地上部茎叶，描述型性状的多样性指数范围在0.281～1.349，地上部生长势、块茎形状、表皮光滑度、须根数的多样性指数大于1。相关性分析表明，叶片、叶柄长势、茎粗均可以反映地上部植株生长势的强弱，地上部的生长势强弱又与地下部块茎产量密切相关，因此，可从地上部的生长发育情况初步推断产量。主成分分析表明，前5个主成分累计贡献率为80%，第1主成分贡献率为43.76%，主要反映地上部茎叶长势和地下部产量构成。聚类分析可将37份福建山药按基原分成4类，其中以参薯类群的表型遗传多样性水平最高。 结论 福建山药地方品种资源具有丰富的遗传多样性，块茎多样性大于茎叶，地上部长势与产量相关性状互相影响。
2019, 34(11): 1255-1261.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.003
摘要:
目的 对澳洲坚果种质资源花序表型性状进行多样性分析，为澳洲坚果种质资源的鉴定评价以及创新利用提供参考。 方法 花序表型性状的观测和描述方法参照《澳洲坚果种质资源描述规范和数据标准》和《澳洲坚果种质资源鉴定技术规范》，数据统计分析应用聚类和主成分分析的方法。 结果 40 份供试澳洲坚果种质资源中 90% 种质小花为乳白色、50% 种质小花自花序轴基部向顶端依次开放、77.5% 种质无批次开花；花序长度的变异系数最大为 26.30%，小花长度的变异系数最小为 8.60%。聚类分析将 40 份种质资源在欧氏距离为 4.79 时分为 2 个组群，组群内的种质资源以花序长度和小花数量聚类；主成分分析结果将 6 个表型性状简化为 3 个主成分（花量、花色、开花顺序因子），解释的总变异为 71.752%，更为直观地展现了花序表型特点，其结果与聚类分析基本一致。 结论 澳洲坚果种质资源的花序表型性状存在丰富的多样性，花序长度、小花数量、小花颜色和小花开放顺序是花序表型性状多样性构成的主导因子。
2019, 34(11): 1262-1269.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.004
摘要:
目的 研究白介素8（IL-8）基因5′调控区单核苷酸突变对鸡柔嫩艾美耳球虫（E. tenella）抗性指标的影响。 方法 本试验利用DNA直接测序技术，检测京海黄鸡IL-8基因5′调控区单核苷酸多态性（SNPs），并对5′调控区的SNPs突变前后的转录因子进行预测，然后分析SNPs与柔嫩艾美耳球虫抗性指标的关联性。 结果 测序结果表明：IL-8基因5′调控区共检测到3个突变位点（T-550C、G-398T和T-360C），均形成了3种基因型，杂合度在0.436~0.471，PIC值在0.25~0.50，均属于中度多态，且3个突变位点均处于哈代-温伯格平衡状态。生物信息学分析表明：3个突变位点均改变了其原有的转录因子结合位点。关联分析显示：T-550C突变位点的TC型个体的IL-8表达量与TT型差异显著，TC型GSH-PX、CAT、IL-2、IL-6、IFN-γ指标均高于其他2种基因型，但差异不显著。G-398T突变位点的TT型个体SOD活性和GT型个体CAT活性均显著高于GG型；TT型个体NO含量与GG型差异极显著，与GT型差异显著；TT型IL-2表达量显著高于GT型。T-360C突变位点的TT型和TC型个体SOD活性与CC型差异极显著或差异显著；TT型和TC型个体的NO含量均显著高于CC型；TT型个体的IL-2、IL-8表达量均显著高于CC型。 结论 G-398T和T-360C突变位点的TT型个体球虫抗性优于其他基因型个体，T-550C突变位点的杂合型个体球虫抗性优于纯合型个体，表明IL-8基因5′调控区的突变对球虫抗性指标有显著的调控作用，可作为球虫病抗性鸡新品种或新品系的育种参考依据。
2019, 34(11): 1270-1275.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.005
摘要:
目的 探究花生秸秆干物质（DM）、中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）在福清山羊瘤胃内消化降解规律。 方法 本试验选用3头安装有永久性瘤胃瘘管的福清山羊为试验动物，采用尼龙袋法，对4份不同地区不同季节采集的花生秸秆（花生秸秆1为2016年10月28日收获于清流、花生秸秆2为2017年6月19日收获于清流、花生秸秆3为2017年6月3日收获于福清、花生秸秆4为2017年11月10日收获于清流）样本的干物质（DM）、酸性洗涤纤维（ADF）和中性洗涤纤维（NDF）在各个时间点（4、8、16、24、36、48、72 h）的瘤胃降解率和降解参数进行测定。 结果 花生秸秆2和花生秸秆4的粗蛋白质含量较高，中性洗涤纤维较低。在福清山羊瘤胃内，4种花生秸秆样本的DM、NDF和ADF在瘤胃内降解趋势类似，均随着降解时间延长呈现上升的趋势，48–72 h花生秸秆DM的降解率达到50%–57%。 结论 综合评价，在清流10月底和11月初收获的两份花生秸秆的降解率较高，说明福清山羊对秋收花生秸秆消化率较高。
2019, 34(11): 1276-1282.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.006
摘要:
目的 分析骨形成蛋白（Bone morphogenetic proteins，BMPs）基因在鸡胚不同发育阶段的表达水平，为进一步研究BMPs基因的功能提供依据。 方法 选取AA肉鸡种蛋100枚进行孵化，分别于孵化期第1、2、3、4、5、6、9、12、15、18 d（记为E1～E18）选取胚蛋6枚，E1～E6采集整胚，E12～E18分别采集大脑、心脏、肝脏和腿肌组织。采用定量PCR（qPCR）方法检测BMP2、BMP4和BMP7基因的表达丰度。 结果 BMP2基因在E1～E6中的表达水平呈现先上升后下降的趋势；BMP2在E4、E5和E6中的表达水平显著高于E1（P＜0.05）；BMP2在大脑中的表达显示，E12显著高于E1（P＜0.05），而到了E18阶段反而极显著低于E1（P＜0.01）；BMP2在心脏和腿肌中的表达均是E9显著或极显著大于E1（P＜0.05或P＜0.01）；鸡胚发育到了后期（E15和E18），BMP2在心脏和肝脏中的表达却显著或极显著低于E1时期（P＜0.05或P＜0.01）。BMP4在E1～E6中的表达水平也是呈现先上升后下降的趋势；BMP4基因在E3～E6整胚和E9胚龄的大脑、心脏、肝脏和腿肌中的表达水平均显著或极显著高于E1胚龄（P＜0.05或P＜0.01）。BMP7在E4、E5和E6的表达与BMP2、BMP4类似，即BMP7基因的表达水平显著或极显著高于E1时期（P＜0.05或P＜0.01），但在E2和E3时期，BMP7表达水平反而降低了，且E2时期极显著低于E1时期（P＜0.01）；在整胚和大脑中的结果显示，E4～E18阶段BMP7基因的表达水平呈现逐渐降低趋势，到E18时期大脑中的BMP7基因的表达水平极显著低于E1时期（P＜0.01）；与E1相比，在心脏中BMP7到E12时期达到最低水平（P＜0.01），而肝脏中BMP7基因表达水平在E12和E15阶段均极显著低于E1（P＜0.01）。 结论 BMP2、BMP4和BMP7基因在整胚的表达水平呈现先上升后下降趋势，至E4时期到达最高点；BMP2基因在E9、E12、E15和E18的心脏、肝脏和腿肌中的表达均呈现下降趋势。说明BMPs基因在器官形成初期起着关键作用，之后随着器官发育完成BMPs基因的作用逐渐减弱。
2019, 34(11): 1283-1287.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.007
摘要:
目的 探讨IGFBP2基因潜在的遗传变异及其与苏姜猪肉质性状之间的关系。 方法 采用PCR-RFLP技术检测IGFBP2基因在苏姜猪、姜曲海猪、杜洛克猪中的Msp Ⅰ酶切遗传多态性，采用单因素方差分析法分析该多态位点对苏姜猪肉质性状的影响。 结果 在3个猪种试验群体，IGFBP2基因第2内含子内均发现了1个Msp Ⅰ酶切多态性，存在A、B等位基因，AA、AB、BB基因型，优势等位基因为B，优势基因型为AB，多态信息含量均呈现中度多态。苏姜猪试验群体IGFBP2基因AA、AB型个体大理石纹显著高于BB型（P＜0.05），AA型个体五分制肉色和色差仪测得的a值均显著高于AB、BB型（P＜0.05）。 结论 苏姜猪试验群体IGFBP2基因第2内含子内PCR-RFLP-Msp Ⅰ多态性与部分肉质性状间存在一定程度的显著性相关，可以作为与猪肉质性状相关的候选基因加以研究。
2019, 34(11): 1288-1293.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.008
摘要:
目的 研究短时高温处理对黑点切叶野螟生长发育和繁殖的影响，为准确地评估其生防潜能提供科学依据。 方法 将黑点切叶野螟1龄幼虫分别在2种高温（35℃和40℃）暴露4种时长（2、4、8、16 h）后，观察测定幼虫存活率、化蛹率、羽化率、蛹重、发育历期、成虫产卵量等指标。 结果 经2种温度、不同时长的处理后，黑点切叶野螟各项生长发育和繁殖指标均受到不同程度的影响。幼虫存活率显著降低，35℃处理16 h，幼虫存活率由1龄的65.83%降为5龄的28.33%；对化蛹率和羽化率无显著影响；幼虫发育历期随温度升高而延长，2种温度（35℃和40℃）处理16 h后，幼虫历期分别比对照长0.90 d和1.74 d；对蛹期无影响；成虫寿命在经8 h和16 h处理后缩短约1 d；蛹重在8 h和16 h高温处理后略有下降；雌虫产卵量在2种温度下均为处理16 h的最低；对卵的孵化率无显著影响。 结论 黑点切叶野螟受短时高温的影响主要体现在降低存活率和抑制发育速率，影响程度取决于高温强度和持续时间。在供试条件下，黑点切叶野螟均能完成生活史，保持种群的延续，这对生防是有益的。但是，较长时间的高温处理导致幼虫存活率显著下降，这可能是黑点切叶野螟夏季种群密度低的原因。
2019, 34(11): 1294-1301.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.009
摘要:
目的 明确贵州省水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性，为水稻纹枯病的科学防治及合理用药提供参考。 方法 采用菌丝生长速率法测定从贵州省4个地区采集分离的52株水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性及药剂间的相关性。 结果 供试菌株对丙环唑的EC50值为0.058～2.381 μg·mL−1，均值为0.422 μg·mL−1；供试菌株对吡唑醚菌酯的EC50值范围从0.077～0.936 μg·mL−1，均值为0.313 μg·mL−1。抗性水平分析表明，湄潭地区的水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯出现了低抗水平的菌株，抗性频率分别为16.7%、13.3%。聚类分析表明，水稻纹枯病菌对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性差异与菌株地理来源无明显相关性，且这两种药剂的敏感性之间也无显著相关性。 结论 供试菌株中多数菌株对丙环唑和吡唑醚菌酯的敏感性较高。药剂间未产生交互抗性，生产上可以交替使用。
2019, 34(11): 1302-1308.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.010
摘要:
目的 明确解淀粉芽孢杆菌B1619对连作西瓜枯萎病的防效，并探讨其合理施用方法。 方法 在连续种植4年西瓜的土壤环境下，采用随机区组设计，研究供试微生物菌剂在不同施用方式和施用剂量下，对连作西瓜生长、枯萎病发生及根际土壤主要菌群的影响。 结果 解淀粉芽胞杆菌B1619采用穴施方式、剂量（18+9）g·穴−1时对连作西瓜的增产率达到43.20%，中心糖、边糖、商品率均显著增加。该施用方法有效改变了连作西瓜根际的菌群环境，其中细菌数量在开花期和成熟期分别是对照的1.93倍和1.27倍，病原菌尖孢镰刀菌数量分别降低为对照的33.38%和37.19%。 结论 解淀粉芽胞杆菌B1619采用穴施方式、剂量（18+9）g·穴−1对4年连作西瓜产量、品质提升，西瓜枯萎病防治效果最好。
2019, 34(11): 1309-1314.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.011
摘要:
目的 棕榈蓟马Thrips palmi Karny不仅可以直接取食为害作物，而且能够传播正番茄斑萎病毒属Orthotospovirus病毒病害，给我国蔬菜、花卉等经济作物造成了严重危害。本研究探讨了棕榈蓟马成虫消化道的组织学和形态学结构，旨在为今后研究正番茄斑萎病毒属病毒在棕榈蓟马体内的侵染路径提供依据。 方法 利用激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy, CLSM)观察棕榈蓟马消化道整体形态结构，利用透射电子显微镜(transmission electron microscope，TEM)观察棕榈蓟马消化道超微结构。 结果 棕榈蓟马消化道由前肠、中肠、后肠和马氏管组成。前肠包括咽、食道、嗉囊和贲门。中肠分为前中肠、中中肠和后中肠3个部分；中肠没有围食膜，前中肠微绒毛表面有微绒毛膜，后中肠肠壁根据细胞形态分为褶皱端和扁平端，微绒毛没有微绒毛膜。后肠由回肠和直肠组成；回肠的肠壁肌肉发达，肠腔周围有一层角质层；直肠内部有大量微生物。马氏管有4根，着生在中肠与后肠的分界线处；马氏管处微绒毛密集但形状不规则，管壁细胞内有大量囊泡。 结论 本研究描述了棕榈蓟马消化道的形态与组成，分析了不同部位的功能，为研究病原物在蓟马体内的侵染路径奠定基础。
2019, 34(11): 1315-1322.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.012
摘要:
目的 建立鸽蛋和鹌鹑蛋中尼考（florfenicol，FF）及其主要代谢产物氟苯尼考胺（florfenicol amine，FFA）残留检测的加速溶剂萃取/超高效液相色谱-荧光检测（ASE/UPLC-FLD）法，为动物源性食品中FF和FFA残留检测提供新的安全可靠的方法。 方法 采用加速溶剂萃取（ASE）法，用乙腈﹕氨水（98﹕2，V/V）为提取剂萃取样品，用乙腈饱和的正己烷去脂进行纯化，使用由0.005 mol·L-1 NaH2PO4、0.003 mol·L−1十二烷基硫酸钠和0.05%三甲胺组成的流动相供UPLC-FLD检测。 结果 鸽蛋和鹌鹑蛋中FF和FFA在定量限（LOQ）～400 μg·kg−1范围内，目标物的峰面积与其浓度均呈现良好的线性关系，相关系数（R2）均大于0.999 2。样品在LOQ、50.0、100.0、200.0 μg·kg−1的加标水平下的平均回收率为84.69%～98.04%，相对标准偏差（RSD）均低于3.7%。鸽蛋中FF的检测限（LOD）和LOQ为4.8 μg·kg−1和11.2 μg·kg−1，FFA的LOD和LOQ为1.9 μg·kg−1和4.8 μg·kg−1；鹌鹑蛋中FF的LOD和LOQ为4.7 μg·kg−1和10.6 μg·kg−1，FFA的LOD和LOQ为1.8 μg·kg−1和4.6 μg·kg−1。 结论 该方法快速、简单、灵敏度高，适合禽蛋中FF及其代谢产物FFA的检测。
2019, 34(11): 1323-1331.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.013
摘要:
目的 研究猪粪与菌剂配施对山地红壤温室气体排放的影响，为减少温室气体排放提供理论依据。 方法 通过盆栽试验，探讨对照（CK）、复合肥（F）、猪粪（FM）、低量菌剂与猪粪配施（FMI1）、中量菌剂与猪粪配施（FMI2）和高量菌剂与猪粪配施（FMI3）6 种不同处理下土壤温室气体的排放规律。 结果 （1）施用菌剂可以显著降低CO2、CH4和N2O的排放通量，且高量菌剂与低中量菌剂有显著差异性；（2）高剂量菌剂与CK相比，CO2累计排放量降低了84.33%，CH4累计排放量降低了76.39%，N2O累计排放量降低了86.44%；（3）施用菌剂可以显著降低综合温室效应（GWP），菌剂施用量越大，对温室效应抑制越明显；（4）施用菌剂可以显著提高土壤养分含量。 结论 在施用肥料的基础上配施菌剂，可以降低山地红壤CO2、CH4和N2O排放通量与综合温室效应，且菌剂剂量越大，效果越佳。
2019, 34(11): 1332-1341.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.014
摘要:
目的 研究草海国家级自然保护区内的森林群落结构和物种多样性，旨在为研究区内森林的保护和抚育管理提供科学依据。 方法 采用典型样地取样法，在全面踏查的基础上选择分布相对集中、具有一定代表性的地段设置16块20 m×30 m的样地，在每个样地中沿对角线分别设置5块2 m×2 m的灌木样方和5块1 m×1 m的草本样方，从物种组成、外貌特征和物种多样性等方面对森林群落结构和物种多样性进行分析。 结果 草海国家级自然保护区内共有种子植物34科62属74种，其中乔木14种、灌木23种、草本37种。群落分层明显，乔木层主要有云南松、华山松、杉木、槲栎、滇杨、云贵鹅耳枥等，灌木层和草本层的优势种取决于群落类型及其所处的生境。样地内所有个体的垂直结构呈偏正态分布、径级结构呈偏倒“J”型、冠幅结构呈倒“J”型，表明群落结构稳定、生长状况良好。群落中重要值＞5的6个物种在垂直结构、径级结构和冠幅结构方面差异显著。群落内丰富度指数和多样性指数均表现为：草本层＞灌木层＞乔木层，均匀度指数表现为：灌木层＞草本层＞乔木层。 结论 草海国家级自然保护区因地处滇东高原向贵州高原过渡的顶点区域，森林群落物种较少，多样性较低，但群落结构比较稳定；杉木群落大径级植株较多，属于衰退型群落，将逐渐走向衰退；云贵鹅耳枥群落径级结构缺失严重，特别是大径级植株，处于濒危状态，应加强群落的保护和抚育管理。
2019, 34(11): 1342-1346.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.015
摘要:
目的 凝集素是竹荪的一类生理活性物质，为进一步明确其药用功效，开展了长裙竹荪凝集素理化性质研究。 方法 长裙竹荪菌丝体通过生理盐水抽提、20%～75%饱和度的硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose和SephadexG-100柱层析纯化得到长裙竹荪菌丝体凝集素（DIL）；并通过血细胞凝集活性、糖抑制试验、酸碱稳定性、热稳定性分析以及金属离子等因素来测定长裙竹荪菌丝体凝集素的理化性质。 结果 经PAGE显示单一条带，测得其亚基相对分子质量为43.6 kDa。该凝集素对供试的鸽、兔、鸭和鸡血红细胞具有凝集作用，对兔红细胞的凝集作用可被D-半乳糖和N-乙酰胺基-葡萄糖所抑制。长裙竹荪凝集素对热不稳定，经50℃处理10 min，活性明显降低；该凝集素在pH 4.0～8.0都保持着较高的凝集活性，其凝血活性依赖于Ca2+和Mg2+二价金属离子，Mn2+和Zn2+则无影响。 结论 长裙竹荪菌丝体凝集素对动物血红细胞具有较好的凝集活性，而且凝集活性需要在一定浓度的Ca2+和Mg2+才会起作用。
2019, 34(11): 1347-1354.
doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.11.016
摘要:
目的 随着茶产业转型升级速度加快、产业分化和农村劳动力的转移，迫切需要通过茶园质量评价指标体系，为茶园流转提供价值评估参考依据，推进茶园经营的规模化和茶产业服务规模化。 方法 参考林地质量评价与耕地质量评价指标，通过文献研究和专家访谈，从气象、土壤、地形地貌、茶树质量、茶园结构与安全5个方面设计了茶园质量27个评价指标，利用专家问卷调查和层次分析法确定指标权重，并结合专业理论和专家意见，制定二级指标评分参考标准，最终获得茶园质量总分公式。 结果 （1）5个一级指标权重分别为0.221 1、0.380 0、0.060 7、0.221 1、0.117 1；（2）指标隶属关系分析表明一级指标与茶园质量、二级指标与其一级指标间均有较高的隶属度。 结论 本研究的茶园质量评价指标体系可在茶园流转时聘请专家参照二级指标评分标准带入公式计算茶园质量的总分，为评估茶园价值提供参考。
